MML-1

MML-1-cellelinjen er en melanomcellelinje som stammer fra malignt melanom. Denne cellelinjen brukes primært til å studere melanomets biologi, spesielt den rollen ekstracellulære vesikler (EVs) spiller i celle-til-celle-kommunikasjon og tumorprogresjon. MML-1-celler frigjør ulike undertyper av EV-er, inkludert eksosomer, mikrovesikler og apoptotiske legemer, som alle inneholder forskjellige RNA-kargoer, for eksempel mikroRNAer (miRNAer) og andre ikke-kodende RNAer.

Studier med MML-1-celler har vist at eksosomer som frigjøres fra disse cellene, inneholder spesifikke miRNA som miR-214-3p, miR-199a-3p og miR-155-5p, som er nært forbundet med melanomprogresjon og metastase. Disse miRNA-ene er anriket i eksosomer sammenlignet med andre EV-typer, og de har blitt knyttet til viktige melanomrelaterte veier, som regulering av MAPK-signalveien og interaksjoner med tumorens mikromiljø. Interessant nok viser sammenligninger av miRNA-profiler fra MML-1-avledede eksosomer med kliniske prøver av melanom en betydelig overlapping, noe som indikerer den kliniske relevansen av denne cellemodellen for å forstå melanomprogresjon.

I tillegg til miRNA frigjør MML-1-celler også andre ikke-kodende RNA-er, som små nukleolære RNA-er (snoRNA-er) og mitokondrieassosierte transfer-RNA-er (mt-RNA-er), som er ulikt fordelt mellom de ulike subtypene av EV-er. Disse funnene understreker MML-1-cellelinjens anvendelighet i studier av de molekylære mekanismene ved føflekkreft, spesielt hvordan tumorceller kommuniserer via EV-er og påvirker mikromiljøet sitt.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring