MML-1

La línea celular MML-1 es una línea celular de melanoma derivada de un melanoma maligno. Esta línea celular se utiliza principalmente para estudiar la biología del melanoma, en particular el papel de las vesículas extracelulares (EV) en la comunicación entre células y la progresión tumoral. Las células MML-1 liberan diversos subtipos de VE, entre ellos exosomas, microvesículas y cuerpos apoptóticos, cada uno de los cuales transporta cargas distintas de ARN, como microARN (miARN) y otros ARN no codificantes.

Estudios realizados con células MML-1 han demostrado que los exosomas liberados por estas células contienen miARN específicos como el miR-214-3p, el miR-199a-3p y el miR-155-5p, los cuales están estrechamente relacionados con la progresión y la metástasis del melanoma. Estos miARN se encuentran en mayor cantidad en los exosomas en comparación con otros tipos de vesículas extracelulares y se han relacionado con importantes vías relacionadas con el melanoma, como la regulación de la vía de señalización MAPK y las interacciones con el microambiente tumoral. Curiosamente, las comparaciones de los perfiles de miARN de los exosomas derivados de MML-1 con muestras clínicas de melanoma muestran un solapamiento significativo, lo que indica la relevancia clínica de este modelo celular para comprender la progresión del melanoma.

Además de los miARN, las células MML-1 también liberan otros ARN no codificantes, como los ARN nucleolares pequeños (snoARN) y los ARN de transferencia asociados a las mitocondrias (mt-ARN), que se distribuyen de manera diferencial entre los subtipos de EV. Estos hallazgos resaltan la utilidad de la línea celular MML-1 para estudiar los mecanismos moleculares del melanoma, en particular cómo las células tumorales se comunican a través de las EV e influyen en su microambiente.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.