Перейти до вмісту
MML-1
Тканина
Шкіра
Хвороба
Меланома
Синоніми
MML1

Документи

MML-1

Cell line · Номер товару 300288

Клітинна лінія MML-1 — це клітинна лінія меланоми, отримана із злоякісної меланоми. Ця клітинна лінія використовується насамперед для вивчення біології меланоми, зокрема...

€800.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
1

01Загальна інформація

Опис

Клітинна лінія MML-1 - це лінія клітин меланоми, отримана зі злоякісної меланоми. Ця клітинна лінія використовується в основному для вивчення біології меланоми, зокрема ролі позаклітинних везикул (ЕВ) у міжклітинній комунікації та прогресії пухлини. Клітини MML-1 вивільняють різні підтипи ЕВ, включаючи екзосоми, мікровезикули та апоптотичні тільця, кожен з яких несе окремі РНК-вантажі, такі як мікроРНК (міРНК) та інші некодуючі РНК.

Дослідження на клітинах MML-1 показали, що екзосоми, які вивільняються з цих клітин, містять специфічні мікроРНК, такі як miR-214-3p, miR-199a-3p і miR-155-5p, які тісно пов'язані з прогресуванням і метастазуванням меланоми. Ці міРНК збагачені в екзосомах порівняно з іншими типами ЕВ і пов'язані з важливими шляхами, пов'язаними з меланомою, такими як регуляція сигнального шляху MAPK і взаємодія з пухлинним мікрооточенням. Цікаво, що порівняння профілів міРНК з екзосом, отриманих з MML-1, з клінічними зразками меланоми демонструє значний збіг, що вказує на клінічну значущість цієї клітинної моделі для розуміння прогресування меланоми.

На додаток до міРНК, клітини MML-1 також вивільняють інші некодуючі РНК, такі як малі нуклеолярні РНК (snoRNA) і мітохондріально-асоційовані транспортні РНК (mt-RNA), які диференційовано розподіляються між підтипами EV. Ці результати підкреслюють корисність клітинної лінії MML-1 для вивчення молекулярних механізмів меланоми, зокрема, як пухлинні клітини спілкуються за допомогою ЕВ і впливають на своє мікрооточення.

Тканина
Шкіра
Хвороба
Меланома
Синоніми
  • MML1

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Не вказано
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Епітеліальноподібні
Пухлиноутворювальний
Так, у голих мишей

04Ідентифікатори

Посилання
MML-1 (номер за каталогом Cytion 300288)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_6004

05Експресія та сприйнятливість

Експресія білків
P53 позитивний
Профіль мутацій
Мутацію BRAF типу V600E визначали методами на основі ДНК (секвенування, RT-PCR) та методами на основі білка (Вестерн-блот).
Зворотна транскриптаза
Негативно

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
RPMI 1640, w: 2,0 мМ стабільний глютамін, w: 2,0 г/л NaHCO3 (номер за каталожним номером 820700a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Щільність висіву
1 x 104 клітин/см2
Оновлення рідини
2-3 рази на тиждень
Відновлення після відлиги
Після розморожування висійте клітини з щільністю 5 x 104 клітин/см2 і дайте клітинам відновитися після процесу заморожування та прикріпитися протягом щонайменше 24 годин.
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Вік донора
Не визначено