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Cellules MOLT-4
Tissu
Sang périphérique
Maladie
Leucémie lymphoblastique aiguë T de l'adulte
Synonymes
Molt-4, MOLT 4, Molt 4, MOLT.4, MOLT4, Molt4, GM02219, GM02219C, GM2219C, GM02219D

Documents

Cellules MOLT-4

Cell line · Référence du produit 300115

MOLT-4 est une lignée cellulaire de lymphoblastes T issue du sang périphérique d'un patient de sexe masculin âgé de 19 ans atteint d'une leucémie lymphoblastique aiguë (LLA) en récidive à…

€430.00hors taxes et frais de port

Personnalisation / Recommandations

En stock
Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

MOLT-4 est une lignée de lymphoblastes T dérivée du sang périphérique d'un homme de 19 ans atteint d'une leucémie lymphoblastique aiguë (LLA) en rechute en 1971. C'est une lignée sœur de MOLT-3, mais MOLT-4 présente un réarrangement inhabituel du gène de la chaîne gamma du récepteur de l'antigène des cellules T (T-gamma). Les cellules MOLT-4 ont un temps de doublement d'environ 30 heures, se développent en suspension et sont tumorigènes chez les souris nues non traitées, les souris traitées au sérum antilymphocytaire et les souris irradiées.

Les cellules MOLT-4 ont un nombre de chromosomes hypertétraploïde, le nombre modal de chromosomes étant de 95 dans 24 % des cellules, mais elles présentent des anomalies structurelles stables et récurrentes des chromosomes et des télomères plus longs. MOLT-4 exprime une variété de marqueurs de cellules T, notamment CD1, CD2, CD3A, CD3B, CD3C, CD4, CD5, CD6 et CD7. Elles expriment également des niveaux élevés de désoxynucléotidyl transférase terminale (TdT).

La lignée cellulaire MOLT-4 ne produit pas d'immunoglobuline ni de virus Epstein-Barr. Le patient dont les cellules ont été dérivées avait reçu une chimiothérapie multi-médicamenteuse. Il y a une mutation G -> A au codon 248 du gène p53, et P53 n'est pas exprimé. La lignée a été initialement contaminée par des mycoplasmes mais a été guérie par des antibiotiques.

Tissu
Sang périphérique
Maladie
Leucémie lymphoblastique aiguë T de l'adulte
Synonymes
  • Molt-4
  • MOLT 4
  • Molt 4
  • MOLT.4
  • MOLT4
  • Molt4
  • GM02219
  • GM02219C
  • GM2219C
  • GM02219D

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Homme
Propriétés de croissance
Suspension
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
Cellules rondes
Type de cellule
Lymphocyte T
Caryotype
Hypertétraploïde. Nombre modal : 96. Deux chromosomes X et deux chromosomes Y.

04Identifiants

Référence
MOLT-4 (numéro de catalogue Cytion 300115)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0013

05Expression et sensibilité

Expression des protéines
P53 positif
Expression des antigènes
CD1 (49%), CD2 (35%), CD3 A (26%) B (33%) C (34%), CD4 (55%), CD5 (72%), CD6 (22%), CD7 (77%)
Profil mutationnel
G -> A au codon 248 du gène p53, P53 n'est pas exprimé (Rodrigues, 1990).
Virus
Les cellules ne produisent pas d'immunoglobuline ni de virus Epstein-Barr (Minowada, 1972).
Produits
Des niveaux élevés de désoxynucléotidyl transférase terminale (TdT) sont produits

06Manipulation et culture

Milieu de culture
RPMI 1640, w : 2.0 mM Glutamine stable, w : 2.0 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820700a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Repiquage
Entretenez les cultures en ajoutant ou en remplaçant périodiquement le milieu. Démarrez les cultures avec une densité de 5 x 105 cellules/ml et maintenez la concentration cellulaire dans une fourchette comprise entre 3 x 105 et 1 x 106 cellules/ml pour une croissance optimale.
Densité de semis
1 x 105 cellules/cm2
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Récupération après le dégel
24 à 48 heures
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
19 ans
Origine ethnique
Caucasien