Gå direkt till innehållet
MOLT-4-celler
Vävnad
Perifert blod
Sjukdom
Akut lymfoblastisk leukemi hos vuxna T
Synonymer
Molt-4, MOLT 4, Molt 4, MOLT.4, MOLT4, Molt4, GM02219, GM02219C, GM2219C, GM02219D

MOLT-4-celler

Cell line · Produktnummer 300115

MOLT-4 är en T-lymfoblastcellinje som härrör från perifert blod hos en 19-årig manlig patient med akut lymfoblastisk leukemi (ALL) i återfall i ...

€430.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

MOLT-4 är en T-lymfoblastcellinje som härrör från perifert blod från en 19-årig manlig patient med akut lymfatisk leukemi (ALL) i återfall 1971. Det är en systercellinje till MOLT-3, medan MOLT-4 uppvisar ett ovanligt omarrangemang av T-cellsantigenreceptorns gamma-kedjegen (T-gamma). MOLT-4-cellerna har en fördubblingstid på cirka 30 timmar, växer i suspension och är tumörframkallande i obehandlade nakna möss, möss som behandlats med anti-lymfocytserum och x-bestrålade möss.

MOLT-4-celler har ett hypertetraploid kromosomantal med det modala kromosomantalet 95 som förekommer i 24% av cellerna, men uppvisar stabila och återkommande strukturella avvikelser i kromosomerna och längre telomerlängd. MOLT-4 uttrycker en mängd olika T-cellsmarkörer, inklusive CD1, CD2, CD3A, CD3B, CD3C, CD4, CD5, CD6 och CD7. De uttrycker också höga nivåer av terminal deoxynukleotidyltransferas (TdT).

MOLT-4-cellinjen producerar inte immunglobulin eller Epstein-Barr-virus. Den patient från vilken cellerna härrörde hade tidigare fått kemoterapi med flera läkemedel. Det finns en G -> A-mutation vid kodon 248 i p53-genen, och P53 uttrycks inte. Linjen var ursprungligen kontaminerad med mykoplasma men har sedan dess botats med antibiotika.

Vävnad
Perifert blod
Sjukdom
Akut lymfoblastisk leukemi hos vuxna T
Synonymer
  • Molt-4
  • MOLT 4
  • Molt 4
  • MOLT.4
  • MOLT4
  • Molt4
  • GM02219
  • GM02219C
  • GM2219C
  • GM02219D

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Man
Tillväxtegenskaper
Upphängning
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Runda celler
Celltyp
T-lymfocyt
Karyotyp
Hypertetraploid. Modalt antal: 96. Två X- och två Y-kromosomer.

04Identifierare

Källa
MOLT-4 (Cytion katalognummer 300115)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0013

05Uttryck och mottaglighet

Proteinexpression
P53-positiv
Antigenuttryck
CD1 (49 %), CD2 (35 %), CD3 A (26 %) B (33 %) C (34 %), CD4 (55 %), CD5 (72 %), CD6 (22 %), CD7 (77 %)
Mutationsprofil
G -> A-mutation vid kodon 248 i p53-genen, P53 uttrycks inte (Rodrigues, 1990).
Virus
Cellerna producerar inte immunoglobulin eller Epstein-Barr-virus (Minowada, 1972).
Produkter
Höga halter av terminalt deoxynukleotidyltransferas (TdT) produceras

06Hantering och odling

Odlingsmedium
RPMI 1640, med: 2,0 mM stabilt glutamin, med: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Vidareodling
Underhåll odlingarna genom att regelbundet tillsätta eller byta ut odlingsmediet. Starta odlingarna med en densitet på 5 x 105 celler/ml och håll cellkoncentrationen inom intervallet 3 x 105 till 1 x 106 celler/ml för optimal tillväxt.
Såtäthet
1 x 105 celler/cm2
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Återhämtning efter upptining
24 till 48 timmar
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Donatorns ålder
19 år
Etnicitet
Kaukasisk