Prejsť na obsah
Bunky MOLT-4
Tkanivo
Periférna krv
Choroba
Akútna lymfoblastická leukémia T u dospelých
Synonymá
Molt-4, MOLT 4, Molt 4, MOLT.4, MOLT4, Molt4, GM02219, GM02219C, GM2219C, GM02219D

Dokumenty

Bunky MOLT-4

Cell line · Číslo výrobku 300115

MOLT-4 je bunková línia T-lymfoblastov získaná z periférnej krvi 19-ročného pacienta s akútnou lymfoblastickou leukémiou (ALL) v relapse v ...

€430.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

MOLT-4 je línia T-lymfoblastových buniek získaná z periférnej krvi 19-ročného muža s akútnou lymfoblastovou leukémiou (ALL) v relapse v roku 1971. Je to sesterská bunková línia MOLT-3, pričom MOLT-4 vykazuje neobvyklú prestavbu génu gama reťazca T-bunkového antigénového receptora (T-gamma). Bunky MOLT-4 majú zdvojovací čas približne 30 hodín, rastú v suspenzii a sú nádorové u neliečených nahých myší, myší liečených antilymfocytárnym sérom a u myší ožiarených x-žiaričmi.

Bunky MOLT-4 majú hypertetraploidný počet chromozómov s modálnym počtom chromozómov 95, ktorý sa vyskytuje v 24 % buniek, ale vykazujú stabilné a opakujúce sa štrukturálne abnormality chromozómov a dlhšie teloméry. MOLT-4 exprimuje rôzne markery buniek T vrátane CD1, CD2, CD3A, CD3B, CD3C, CD4, CD5, CD6 a CD7. Taktiež exprimujú vysoké hladiny terminálnej deoxynukleotidyltransferázy (TdT).

Bunková línia MOLT-4 neprodukuje imunoglobulín ani vírus Epsteina-Barrovej. Pacient, od ktorého boli bunky odvodené, dostal predtým chemoterapiu s viacerými liekmi. V kodóne 248 génu p53 je mutácia G -> A a P53 nie je exprimovaný. Línia bola pôvodne kontaminovaná mykoplazmou, ale odvtedy bola vyliečená antibiotikami.

Tkanivo
Periférna krv
Choroba
Akútna lymfoblastická leukémia T u dospelých
Synonymá
  • Molt-4
  • MOLT 4
  • Molt 4
  • MOLT.4
  • MOLT4
  • Molt4
  • GM02219
  • GM02219C
  • GM2219C
  • GM02219D

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Zavesenie
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Okrúhle bunky
Typ bunky
T lymfocyty
Karyotyp
Hypertetraploid. Modálne číslo: 96. Dva chromozómy x a dva chromozómy Y.

04Identifikátory

Citácia
MOLT-4 (katalógové číslo Cytion 300115)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0013

05Prejav a náchylnosť

Expresia proteínov
P53 pozitívny
Expresia antigénu
CD1 (49%), CD2 (35%), CD3 A (26%) B (33%) C (34%), CD4 (55%), CD5 (72%), CD6 (22%), CD7 (77%)
Mutčný profil
G -> A mutácia na kodóne 248 génu p53, P53 nie je exprimovaný (Rodrigues, 1990).
Vírusy
Bunky neprodukujú imunoglobulín ani vírus Epsteina-Barrovej (Minowada, 1972).
Produkty
Produkuje sa vysoké množstvo terminálnej deoxynukleotidyltransferázy (TdT)

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Rozmnožovanie kultúr
Kultúry udržiavajte pravidelným pridávaním alebo výmenou média. Kultúry začnite s hustotou 5 x 105 buniek/ml a pre optimálny rast udržujte koncentráciu buniek v rozmedzí 3 x 105 až 1 x 106 buniek/ml.
Hustota výsevu
1 x 105 buniek/cm2
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Zotavenie po rozmrazení
24 až 48 hodín
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
19 rokov
Etnická príslušnosť
Kaukazský