Pereiti prie turinio
MOLT-4 ląstelės
Audinys
Periferinis kraujas
Liga
Suaugusiųjų T ūminė limfoblastinė leukemija
Sinonimai
Molt-4, MOLT 4, Molt 4, MOLT.4, MOLT4, Molt4, GM02219, GM02219C, GM2219C, GM02219D

Dokumentai

MOLT-4 ląstelės

Cell line · Prekės numeris 300115

MOLT-4 yra T limfoblastų ląstelių linija, gauta iš 19 metų amžiaus vyro, sergančio recidyvuojančia ūmine limfoblastine leukemija (ALL), periferinio kraujo...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

MOLT-4 yra T limfoblastų ląstelių linija, gauta iš 19 metų vyro, sergančio ūmine limfoblastine leukemija (ŪLL), kurios recidyvas įvyko 1971 m., periferinio kraujo. Tai MOLT-3 gimininga ląstelių linija, o MOLT-4 pasižymi neįprastu T ląstelių antigeno receptoriaus gama grandinės geno (T-gama) pertvarkymu. MOLT-4 ląstelių padvigubėjimo laikas yra apie 30 valandų, jos auga suspensijoje ir yra navikinės neapdorotose nuogose pelėse, antilimfocitų serumu apdorotose pelėse ir rentgeno spinduliuote apšvitintose pelėse.

MOLT-4 ląstelės turi hipertetraploidinį chromosomų skaičių, o modalinis chromosomų skaičius 95 pasitaiko 24 % ląstelių, tačiau joms būdingi stabilūs ir pasikartojantys struktūriniai chromosomų pakitimai ir ilgesnis telomerų ilgis. MOLT-4 išreiškia įvairius T ląstelių žymenis, įskaitant CD1, CD2, CD3A, CD3B, CD3C, CD4, CD5, CD6 ir CD7. Jie taip pat išreiškia didelį kiekį terminalinės deoksinukleotidiltransferazės (TdT).

MOLT-4 ląstelių linija negamina imunoglobulino ir Epšteino-Barro viruso. Pacientui, iš kurio buvo gautos ląstelės, prieš tai buvo taikyta chemoterapija daugeliu vaistų. P53 geno 248 kodone yra G -> A mutacija, ir P53 nėra išreikštas. Iš pradžių linija buvo užkrėsta mikoplazma, bet vėliau buvo išgydyta antibiotikais.

Audinys
Periferinis kraujas
Liga
Suaugusiųjų T ūminė limfoblastinė leukemija
Sinonimai
  • Molt-4
  • MOLT 4
  • Molt 4
  • MOLT.4
  • MOLT4
  • Molt4
  • GM02219
  • GM02219C
  • GM2219C
  • GM02219D

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Pakaba
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Apvalios ląstelės
Ląstelių tipas
T limfocitas
Kariotipas
Hipertetraploidai. Modalinis numeris: 96. Dvi x ir dvi Y chromosomos.

04Identifikatoriai

Nuoroda
MOLT-4 (Cytion katalogo numeris 300115)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_0013

05Išraiška ir jautrumas

Baltojų baltymų ekspresija
P53 teigiamas
Antigeno ekspresija
CD1 (49 %), CD2 (35 %), CD3 A (26 %) B (33 %) C (34 %), CD4 (55 %), CD5 (72 %), CD6 (22 %), CD7 (77 %)
Mutacijų profilis
G -> A mutacija p53 geno 248 kodone, P53 nėra išreikštas (Rodrigues, 1990).
Virusai
Ląstelės negamina imunoglobulino ir Epšteino-Barro viruso (Minowada, 1972).
Produktai
Susidaro didelis kiekis terminalinės deoksinukleotidiltransferazės (TdT)

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
RPMI 1640, š: 2,0 mM stabilus glutaminas, š: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Subkultūrinis auginimas
Kultūras prižiūrėkite periodiškai papildydami arba keisdami terpę. Kultūras pradėkite su 5 x 105 ląstelių/ml tankiu ir, siekdami optimalaus augimo, palaikykite ląstelių koncentraciją nuo 3 x 105 iki 1 x 106 ląstelių/ml.
Sėjos tankis
1 x 105 ląstelių/cm2
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atkūrimas po atšilimo
24-48 valandos
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
19 metų
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių