Preskoči na vsebino
Celice MOLT-4
Tkivo
Periferna kri
Bolezen
Akutna limfoblastna levkemija T pri odraslih
Sinonimi
Molt-4, MOLT 4, Molt 4, MOLT.4, MOLT4, Molt4, GM02219, GM02219C, GM2219C, GM02219D

Dokumenti

Celice MOLT-4

Cell line · Številka izdelka 300115

MOLT-4 je linija T-limfoblastnih celic, pridobljena iz periferne krvi 19-letnega moškega bolnika z akutno limfoblastno levkemijo (ALL) v ponovitvi v ...

€430.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

MOLT-4 je limfoblastna celična linija T, pridobljena iz periferne krvi 19-letnega bolnika z akutno limfoblastno levkemijo (ALL) v ponovitvi leta 1971. Je sestrska celična linija MOLT-3, medtem ko ima MOLT-4 nenavadno preureditev gena gama verige celičnega antigenskega receptorja T (T-gamma). Celice MOLT-4 imajo podvojitveni čas približno 30 ur, rastejo v suspenziji in so tumorogene pri neobdelanih golih miših, miših, obdelanih s serumom proti limfocitom, in miših, obsevanih z x-žarčenjem.

Celice MOLT-4 imajo hipertraploidno število kromosomov z modalnim številom kromosomov 95, ki se pojavlja pri 24 % celic, vendar kažejo stabilne in ponavljajoče se strukturne nepravilnosti kromosomov in daljšo dolžino telomer. MOLT-4 izraža različne označevalce celic T, vključno s CD1, CD2, CD3A, CD3B, CD3C, CD4, CD5, CD6 in CD7. Izražajo tudi visoko raven terminalne deoksinukleotidil transferaze (TdT).

Celična linija MOLT-4 ne proizvaja imunoglobulina ali virusa Epstein-Barr. Bolnik, iz katerega so bile pridobljene celice, je predhodno prejel kemoterapijo z več zdravili. Na kodonu 248 gena p53 je mutacija G -> A in gen P53 ni izražen. Linija je bila sprva okužena z mikoplazmo, vendar je bila nato ozdravljena z antibiotiki.

Tkivo
Periferna kri
Bolezen
Akutna limfoblastna levkemija T pri odraslih
Sinonimi
  • Molt-4
  • MOLT 4
  • Molt 4
  • MOLT.4
  • MOLT4
  • Molt4
  • GM02219
  • GM02219C
  • GM2219C
  • GM02219D

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Vzmetenje
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Okrogle celice
Vrsta celice
Limfocit T
Kariotip
Hipertetraploid. Modalna številka: 96. Dva kromosoma x in dva kromosoma Y.

04Identifikatorji

Navajanje vira
MOLT-4 (kataloška številka Cytion 300115)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0013

05Izražanje in dovzetnost

Ekspresija beljakovin
P53 pozitiven
Ekspresija antigena
CD1 (49 %), CD2 (35 %), CD3 A (26 %) B (33 %) C (34 %), CD4 (55 %), CD5 (72 %), CD6 (22 %), CD7 (77 %)
Profil mutacij
Mutacija G -> A na kodonu 248 gena p53 se ne izraža (Rodrigues, 1990).
Virusi
Celice ne proizvajajo imunoglobulinov ali virusa Epstein-Barr (Minowada, 1972).
Izdelki
Nastane velika količina terminalne deoksinukleotidiltransferaze (TdT)

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Preusmeritev v drugo kulturo
Kulture vzdržujte z rednim dodajanjem ali zamenjavo gojišča. Kulture začnite z gostoto 5 x 105 celic/ml in za optimalno rast ohranjajte koncentracijo celic v območju od 3 x 105 do 1 x 106 celic/ml.
Gostota setve
1 x 105 celic/cm2
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Obnova po odtaljevanju
24 do 48 ur
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
19 let
Etnična pripadnost
Kavkaški