Gå til innholdet
MOLT-4-celler
Vev
Perifert blod
Sykdom
Akutt lymfoblastisk leukemi hos voksne T
Synonymer
Molt-4, MOLT 4, Molt 4, MOLT.4, MOLT4, Molt4, GM02219, GM02219C, GM2219C, GM02219D

Dokumenter

MOLT-4-celler

Cell line · Produktnummer 300115

MOLT-4 er en T-lymfoblastcellelinje som stammer fra perifert blod fra en 19 år gammel mannlig pasient med akutt lymfoblastisk leukemi (ALL) i tilbakefall i ...

€430.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

MOLT-4 er en T-lymfoblastcellelinje som stammer fra perifert blod fra en 19 år gammel mannlig pasient med akutt lymfoblastisk leukemi (ALL) i tilbakefall i 1971. Det er en søstercellelinje til MOLT-3, mens MOLT-4 viser en uvanlig rearrangering av T-celle antigenreseptor gamma-kjede-genet (T-gamma). MOLT-4-celler har en fordoblingstid på rundt 30 timer, vokser i suspensjon og er tumorigeniske i ubehandlede nakne mus, anti-lymfocytt-serumbehandlede mus og x-bestrålte mus.

MOLT-4-celler har et hypertetraploid kromosomtall med et modalt kromosomtall på 95, som forekommer i 24 % av cellene, men viser stabile og tilbakevendende strukturelle kromosomavvik og lengre telomerlengde. MOLT-4 uttrykker en rekke T-cellemarkører, inkludert CD1, CD2, CD3A, CD3B, CD3C, CD4, CD5, CD6 og CD7. De uttrykker også høye nivåer av terminal deoksynukleotidyltransferase (TdT).

MOLT-4-cellelinjen produserer ikke immunglobulin eller Epstein-Barr-virus. Pasienten som cellene stammer fra, hadde tidligere fått kjemoterapi med flere legemidler. Det er en G -> A-mutasjon ved kodon 248 i p53-genet, og P53 uttrykkes ikke. Linjen var opprinnelig kontaminert med mykoplasma, men har siden blitt kurert med antibiotika.

Vev
Perifert blod
Sykdom
Akutt lymfoblastisk leukemi hos voksne T
Synonymer
  • Molt-4
  • MOLT 4
  • Molt 4
  • MOLT.4
  • MOLT4
  • Molt4
  • GM02219
  • GM02219C
  • GM2219C
  • GM02219D

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Oppheng
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Runde celler
Celletype
T-lymfocytt
Karyotype
Hypertetraploid. Modalt antall: 96. To X- og to Y-kromosomer.

04Identifikatorer

Kildehenvisning
MOLT-4 (Cytion katalognummer 300115)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0013

05Uttrykk og mottakelighet

Proteinekspresjon
P53-positiv
Antigenuttrykk
CD1 (49 %), CD2 (35 %), CD3 A (26 %) B (33 %) C (34 %), CD4 (55 %), CD5 (72 %), CD6 (22 %), CD7 (77 %)
Mutasjonsprofil
G -> A-mutasjon ved kodon 248 i p53-genet, uttrykkes ikke P53 (Rodrigues, 1990).
Virus
Cellene produserer ikke immunglobulin eller Epstein-Barr-virus (Minowada, 1972).
Produkter
Det produseres høye nivåer av terminal deoksynukleotidyltransferase (TdT)

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Subkultivering
Oppretthold kulturene ved å tilsette eller skifte ut mediet med jevne mellomrom. Start kulturene med en tetthet på 5 x 105 celler/ml og hold cellekonsentrasjonen innenfor området 3 x 105 til 1 x 106 celler/ml for optimal vekst.
Såtetthet
1 x 105 celler/cm2
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Gjenoppretting etter tining
24 til 48 timer
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
19 år
Etnisitet
Kaukasisk