Células MOLT-4

MOLT-4 es una línea celular de linfoblastos T derivada de la sangre periférica de un paciente varón de 19 años con leucemia linfoblástica aguda (LLA) en recaída en 1971. Es una línea celular hermana de MOLT-3, mientras que MOLT-4 muestra un reordenamiento inusual del gen de la cadena gamma del receptor de antígeno de células T (T-gamma). Las células MOLT-4 tienen un tiempo de duplicación de unas 30 horas, crecen en suspensión y son tumorigénicas en ratones desnudos no tratados, en ratones tratados con suero antilinfocitario y en ratones irradiados con x.

Las células MOLT-4 tienen un número cromosómico hipertetraploide con un número cromosómico modal de 95 que se da en el 24% de las células, pero muestran anomalías estructurales estables y recurrentes de los cromosomas y una mayor longitud de los telómeros. MOLT-4 expresa diversos marcadores de células T, como CD1, CD2, CD3A, CD3B, CD3C, CD4, CD5, CD6 y CD7. También expresan altos niveles de desoxinucleotidil transferasa terminal (TdT).

La línea celular MOLT-4 no produce inmunoglobulina ni el virus de Epstein-Barr. El paciente del que proceden las células había recibido previamente quimioterapia multimedicamentosa. Existe una mutación G -> A en el codón 248 del gen p53, y el P53 no se expresa. La línea se contaminó inicialmente con micoplasma, pero desde entonces se ha curado con antibióticos.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía