Células MOLT-4

A MOLT-4 é uma linha celular de linfoblastos T derivada do sangue periférico de um doente do sexo masculino de 19 anos com leucemia linfoblástica aguda (LLA) em recaída em 1971. É uma linha celular irmã da MOLT-3, enquanto a MOLT-4 apresenta um rearranjo invulgar do gene da cadeia gama do recetor do antigénio das células T (T-gama). As células MOLT-4 têm um tempo de duplicação de cerca de 30 horas, crescem em suspensão e são tumorigénicas em ratinhos nus não tratados, em ratinhos tratados com soro anti-linfócitos e em ratinhos irradiados com x.

As células MOLT-4 têm um número cromossómico hipertetraplóide, com o número cromossómico modal de 95 a ocorrer em 24% das células, mas apresentam anomalias estruturais estáveis e recorrentes dos cromossomas e um comprimento mais longo dos telómeros. O MOLT-4 exprime uma variedade de marcadores de células T, incluindo CD1, CD2, CD3A, CD3B, CD3C, CD4, CD5, CD6 e CD7. Também exprimem níveis elevados de desoxinucleotidil transferase terminal (TdT).

A linha celular MOLT-4 não produz imunoglobulina nem o vírus Epstein-Barr. O doente de quem as células foram derivadas tinha recebido quimioterapia prévia com múltiplos fármacos. Existe uma mutação G -> A no códão 248 do gene p53, e o p53 não é expresso. A linha foi inicialmente contaminada com micoplasma, mas desde então foi curada com antibióticos.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia