Células MOLT-4

MOLT-4 es una línea celular de linfoblastos T derivada de la sangre periférica de un paciente varón de 19 años con leucemia linfoblástica aguda (LLA) en recaída en 1971. Es una línea celular hermana de MOLT-3, aunque MOLT-4 presenta un reordenamiento inusual del gen de la cadena gamma del receptor de antígenos de las células T (T-gamma). Las células MOLT-4 tienen un tiempo de duplicación de alrededor de 30 horas, crecen en suspensión y son tumorigénicas en ratones desnudos no tratados, en ratones tratados con suero antilinfocitario y en ratones irradiados con rayos X.

Las células MOLT-4 presentan un número cromosómico hipertetraploide, con un número cromosómico modal de 95 que se observa en el 24 % de las células; sin embargo, muestran anomalías estructurales cromosómicas estables y recurrentes, así como una mayor longitud de los telómeros. Las células MOLT-4 expresan una variedad de marcadores de células T, entre ellos CD1, CD2, CD3A, CD3B, CD3C, CD4, CD5, CD6 y CD7. También expresan altos niveles de desoxinucleotidil transferasa terminal (TdT).

La línea celular MOLT-4 no produce inmunoglobulina ni el virus de Epstein-Barr. El paciente del cual se obtuvieron las células había recibido previamente quimioterapia con múltiples fármacos. Existe una mutación de G a A en el codón 248 del gen p53, y el p53 no se expresa. La línea se contaminó inicialmente con micoplasma, pero desde entonces se ha tratado con antibióticos.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.