MOLT-4細胞

MOLT-4は、1971年に再発した急性リンパ芽球性白血病（ALL）患者（19歳男性）の末梢血から得られたTリンパ芽球細胞株である。MOLT-3の姉妹細胞株であるが、MOLT-4は異常なT細胞抗原受容体ガンマ鎖遺伝子（T-ガンマ）再配列を示す。MOLT-4細胞の倍加時間は約30時間で、懸濁液中で増殖し、無処置のヌードマウス、抗リンパ球血清処理マウス、およびX線照射マウスで腫瘍形成性を示す。

MOLT-4細胞は4倍体の染色体数を有し、24％の細胞に95の染色体数が認められるが、染色体の構造異常が安定的に反復し、テロメアの長さも長い。MOLT-4はCD1、CD2、CD3A、CD3B、CD3C、CD4、CD5、CD6、CD7を含む様々なT細胞マーカーを発現する。また、高レベルのターミナルデオキシヌクレオチジルトランスフェラーゼ（TdT）も発現している。

MOLT-4細胞株は免疫グロブリンやエプスタイン・バーウイルスを産生しない。この細胞の由来となった患者は、以前に多剤併用化学療法を受けていた。p53遺伝子のコドン248にG→Aの変異があり、P53は発現していない。この細胞株は当初マイコプラズマに汚染されていたが、その後抗生物質で治癒した。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。