Cellules MOLT-4

MOLT-4 est une lignée cellulaire de lymphoblastes T dérivée du sang périphérique d’un patient de sexe masculin âgé de 19 ans atteint d’une leucémie lymphoblastique aiguë (LLA) en rechute en 1971. Il s’agit d’une lignée cellulaire sœur de MOLT-3, bien que MOLT-4 présente un réarrangement inhabituel du gène de la chaîne gamma du récepteur antigénique des lymphocytes T (T-gamma). Les cellules MOLT-4 ont un temps de doublement d’environ 30 heures, se développent en suspension et sont tumorigènes chez les souris nues non traitées, les souris traitées au sérum anti-lymphocytaire et les souris irradiées aux rayons X.

Les cellules MOLT-4 présentent un caryotype hypertétraploïde, avec un nombre modal de 95 chromosomes observé dans 24 % des cellules; elles présentent toutefois des anomalies structurelles chromosomiques stables et récurrentes, ainsi qu’une longueur de télomères plus importante. Les cellules MOLT-4 expriment divers marqueurs des cellules T, notamment CD1, CD2, CD3A, CD3B, CD3C, CD4, CD5, CD6 et CD7. Elles expriment également des niveaux élevés de désoxynucléotidyl-transférase terminale (TdT).

La lignée cellulaire MOLT-4 ne produit ni immunoglobuline ni virus d’Epstein-Barr. Le patient dont proviennent ces cellules avait préalablement reçu une chimiothérapie polychimique. On observe une mutation G → A au codon 248 du gène p53, et la protéine p53 n’est pas exprimée. La lignée a d’abord été contaminée par des mycoplasmes, mais a depuis été traitée avec succès à l’aide d’antibiotiques.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.