Přejít na obsah
Buňky MOLT-4
Tkáň
Periferní krev
Nemoc
Akutní lymfoblastická leukémie T u dospělých
Synonyma
Molt-4, MOLT 4, Molt 4, MOLT.4, MOLT4, Molt4, GM02219, GM02219C, GM2219C, GM02219D

Dokumenty

Buňky MOLT-4

Cell line · Číslo výrobku 300115

MOLT-4 je buněčná linie T-lymfoblastů odvozená z periferní krve 19letého pacienta s akutní lymfoblastickou leukémií (ALL) v relapsu v ...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

MOLT-4 je T-lymfoblastová buněčná linie získaná z periferní krve 19letého pacienta s akutní lymfoblastickou leukémií (ALL) v relapsu v roce 1971. Jedná se o sesterskou buněčnou linii MOLT-3, přičemž MOLT-4 vykazuje neobvyklou přestavbu genu pro gama řetězec T-buněčného antigenního receptoru (T-gamma). Buňky MOLT-4 mají dobu zdvojení přibližně 30 hodin, rostou v suspenzi a jsou tumorigenní u neošetřených nahých myší, u myší ošetřených antilymfocytárním sérem a u myší ozářených rentgenem.

Buňky MOLT-4 mají hypertetraploidní počet chromozomů s modálním počtem chromozomů 95, který se vyskytuje u 24 % buněk, ale vykazují stabilní a opakující se strukturální abnormality chromozomů a delší telomery. MOLT-4 exprimuje řadu T buněčných markerů včetně CD1, CD2, CD3A, CD3B, CD3C, CD4, CD5, CD6 a CD7. Rovněž exprimují vysoké hladiny terminální deoxynukleotidyltransferázy (TdT).

Buněčná linie MOLT-4 neprodukuje imunoglobulin ani virus Epsteina-Barrové. Pacient, od něhož byly buňky odvozeny, podstoupil předchozí chemoterapii více léky. V kodonu 248 genu p53 je mutace G -> A a gen P53 není exprimován. Linie byla původně kontaminována mykoplazmaty, ale od té doby byla vyléčena antibiotiky.

Tkáň
Periferní krev
Nemoc
Akutní lymfoblastická leukémie T u dospělých
Synonyma
  • Molt-4
  • MOLT 4
  • Molt 4
  • MOLT.4
  • MOLT4
  • Molt4
  • GM02219
  • GM02219C
  • GM2219C
  • GM02219D

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Odpružení
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Kulaté buňky
Typ buňky
T lymfocyty
Karyotyp
Hypertetraploid. Modální číslo: 96. Dva chromozomy x a dva chromozomy Y.

04Identifikátory

Citace
MOLT-4 (katalogové číslo Cytion 300115)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0013

05Exprese a náchylnost

Exprese proteinů
P53 pozitivní
Exprese antigenu
CD1 (49 %), CD2 (35 %), CD3 A (26 %) B (33 %) C (34 %), CD4 (55 %), CD5 (72 %), CD6 (22 %), CD7 (77 %)
Mutační profil
G -> A mutace v kodonu 248 genu p53, P53 není exprimován (Rodrigues, 1990).
Viry
Buňky neprodukují imunoglobulin ani virus Epsteina-Barrové (Minowada, 1972).
Produkty
Vznikají vysoké hladiny terminální deoxynukleotidyltransferázy (TdT)

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Subkultivace
Kultury udržujte pravidelným přidáváním nebo výměnou média. Zahajte kultury s hustotou 5 x 105 buněk/ml a pro optimální růst udržujte koncentraci buněk v rozmezí 3 x 105 až 1 x 106 buněk/ml.
Hustota výsevu
1 x 105 buněk/cm2
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Zotavení po rozmrazení
24 až 48 hodin
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
19 let
Etnická příslušnost
Kavkazský