MOLT-4 šūnas

MOLT-4 ir T limfoblastu šūnu līnija, kas iegūta no perifērajām asinīm 19 gadus vecam vīrietim, kuram 1971. gadā bija akūta limfoblastiskā leikēmija (ALL) recidīva stadijā. Tā ir MOLT-3 māsas šūnu līnija, bet MOLT-4 uzrāda neparastu T-šūnu antigēna receptoru gamma ķēdes gēna (T-gamma) pārkārtojumu. MOLT-4 šūnu dubultošanās laiks ir aptuveni 30 stundas, tās aug suspensijā un ir audzējamas neapstrādātām nude pelēm, pret limfocītu serumu apstrādātām pelēm un ksi apstarotām pelēm.

MOLT-4 šūnām ir hipertetraploīds hromosomu skaits, un 24 % šūnu hromosomu skaits ir 95, bet tām ir stabilas un atkārtotas hromosomu struktūras anomālijas un lielāks telomēru garums. MOLT-4 ekspresē dažādus T šūnu marķierus, tostarp CD1, CD2, CD3A, CD3B, CD3C, CD4, CD5, CD6 un CD7. Tās arī lielā daudzumā ekspresē termināldeoksinukleotidiltransferāzi (TdT).

MOLT-4 šūnu līnija neražo imūnglobulīnu vai Epšteina-Barra vīrusu. Pacients, no kura tika iegūtas šūnas, iepriekš bija saņēmis ķīmijterapiju ar vairākiem medikamentiem. P53 gēna 248. kodonā ir G -> A mutācija, un P53 nav izteikts. Sākotnēji līnija bija inficēta ar mikoplazmu, bet kopš tā laika ir izārstēta ar antibiotikām.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu