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MOLT-4-Zellen
Gewebe
Peripheres Blut
Krankheit
Akute lymphoblastische T-Leukämie bei Erwachsenen
Synonyme
Molt-4, MOLT 4, Molt 4, MOLT.4, MOLT4, Molt4, GM02219, GM02219C, GM2219C, GM02219D

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MOLT-4-Zellen

Cell line · Artikelnummer 300115

MOLT-4 ist eine T-Lymphoblasten-Zelllinie, die aus dem peripheren Blut eines 19-jährigen männlichen Patienten mit akuter lymphoblastischer Leukämie (ALL) im Rezidiv in … gewonnen wurde.

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

MOLT-4 ist eine T-Lymphoblasten-Zelllinie, die aus dem peripheren Blut eines 19-jährigen männlichen Patienten mit akuter lymphoblastischer Leukämie (ALL) im Rezidiv 1971 gewonnen wurde. Sie ist eine Schwesterzelllinie von MOLT-3, während MOLT-4 ein ungewöhnliches T-Zell-Antigenrezeptor-Gamma-Ketten-Gen-Rearrangement (T-Gamma) aufweist. MOLT-4-Zellen haben eine Verdopplungszeit von etwa 30 Stunden, wachsen in Suspension und sind in unbehandelten Nacktmäusen, mit Anti-Lymphozyten-Serum behandelten Mäusen und x-bestrahlten Mäusen tumorigen.

MOLT-4-Zellen haben eine hypertetraploide Chromosomenzahl, wobei die modale Chromosomenzahl von 95 in 24 % der Zellen vorkommt, zeigen aber stabile und wiederkehrende strukturelle Anomalien der Chromosomen und eine längere Telomerlänge. MOLT-4 exprimiert eine Vielzahl von T-Zell-Markern wie CD1, CD2, CD3A, CD3B, CD3C, CD4, CD5, CD6 und CD7. Sie exprimieren auch hohe Mengen an terminaler Desoxynukleotidyltransferase (TdT).

Die MOLT-4-Zelllinie produziert kein Immunglobulin oder Epstein-Barr-Virus. Der Patient, von dem die Zellen stammen, hatte zuvor eine multiresistente Chemotherapie erhalten. Es liegt eine G -> A-Mutation am Codon 248 des p53-Gens vor, und P53 wird nicht exprimiert. Die Linie war ursprünglich mit Mykoplasmen kontaminiert, wurde aber inzwischen mit Antibiotika geheilt.

Gewebe
Peripheres Blut
Krankheit
Akute lymphoblastische T-Leukämie bei Erwachsenen
Synonyme
  • Molt-4
  • MOLT 4
  • Molt 4
  • MOLT.4
  • MOLT4
  • Molt4
  • GM02219
  • GM02219C
  • GM2219C
  • GM02219D

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Aussetzung
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Runde Zellen
Zelltyp
T-Lymphozyt
Karyotyp
Hypertetraploid. Modalzahl: 96. Zwei X- und zwei Y-Chromosomen.

04Bezeichner

Quellenangabe
MOLT-4 (Cytion Katalognummer 300115)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_0013

05Expression und Anfälligkeit

Proteinexpression
P53 positiv
Antigenexpression
CD1 (49%), CD2 (35%), CD3 A (26%) B (33%) C (34%), CD4 (55%), CD5 (72%), CD6 (22%), CD7 (77%)
Mutationsprofil
G -> A-Mutation am Codon 248 des p53-Gens, wird P53 nicht exprimiert (Rodrigues, 1990).
Viren
Die Zellen produzieren kein Immunglobulin oder Epstein-Barr-Virus (Minowada, 1972).
Produkte
Es werden hohe Mengen an terminaler Desoxynukleotidyltransferase (TdT) produziert

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Subkultivierung
Halten Sie die Kulturen aufrecht, indem Sie regelmäßig Medium hinzufügen oder austauschen. Beginnen Sie die Kulturen mit einer Dichte von 5 x 105 Zellen/ml und halten Sie die Zellkonzentration im Bereich von 3 x 105 bis 1 x 106 Zellen/ml, um ein optimales Wachstum zu erzielen.
Aussaatdichte
1 x 105 Zellen/cm²
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Erholung nach dem Auftauen
24 bis 48 Stunden
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
19 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch