Mine otse sisu juurde
MOLT-4 rakud
Kude
Perifeerne veri
Haigus
Täiskasvanute T-akuutne lümfoblastileukeemia
Sünonüümid
Molt-4, MOLT 4, Molt 4, MOLT.4, MOLT4, Molt4, GM02219, GM02219C, GM2219C, GM02219D

Dokumendid

MOLT-4 rakud

Cell line · Toote number 300115

MOLT-4 on T-lümfoblastide rakuliin, mis on saadud 19-aastase meespatsiendi perifeersest verest, kellel oli äge lümfoblastiline leukeemia (ALL) retsidiivis ...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

MOLT-4 on T-lümfoblastide rakuliin, mis on saadud 1971. aastal retsidiivse ägeda lümfoblastse leukeemiaga (ALL) 19-aastase meessoost patsiendi perifeersest verest. See on MOLT-3 sõsarrakkude liin, samas kui MOLT-4 näitab ebatavalist T-rakkude antigeeni retseptori gammaahela geeni (T-gamma) ümberpaiknemist. MOLT-4 rakkude kahekordistumisaeg on umbes 30 tundi, nad kasvavad suspensioonis ja on tuumorigeensed töötlemata alasti hiirtel, lümfotsüüdivastase seerumiga töödeldud hiirtel ja x-kiiritatud hiirtel.

MOLT-4 rakkudel on hüpertetraploidne kromosoomide arv, mille modaalne kromosoomide arv 95 esineb 24%-l rakkudest, kuid neil esineb stabiilseid ja korduvaid kromosoomide struktuurilisi kõrvalekaldeid ja pikemaid telomeeride pikkusi. MOLT-4 ekspresseerib mitmeid T-rakkude markereid, sealhulgas CD1, CD2, CD3A, CD3B, CD3C, CD4, CD5, CD6 ja CD7. Samuti ekspresseerivad nad suurel määral terminaalset desoksünukleotidüültransferaasi (TdT).

MOLT-4 rakuliin ei tooda immunoglobuliini ega Epstein-Barri viirust. Patsient, kellelt rakud saadi, oli eelnevalt saanud multiresistentset keemiaravi. P53 geeni koodonis 248 on G -> A mutatsioon ja P53 ei ekspresseeru. Algselt oli liin saastunud mükoplasmaga, kuid on vahepeal antibiootikumidega ravitud.

Kude
Perifeerne veri
Haigus
Täiskasvanute T-akuutne lümfoblastileukeemia
Sünonüümid
  • Molt-4
  • MOLT 4
  • Molt 4
  • MOLT.4
  • MOLT4
  • Molt4
  • GM02219
  • GM02219C
  • GM2219C
  • GM02219D

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Vedrustus
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Ümmargused rakud
Rakutüüp
T-lümfotsüüt
Karyotüüp
Hüpertetraploidne. Modaalnumber: 96. Kaks x- ja kaks Y-kromosoomi.

04Tunnused

Viide
MOLT-4 (Cytioni katalooginumber 300115)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0013

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
P53 positiivne
Antigeeni ekspressioon
CD1 (49%), CD2 (35%), CD3 A (26%) B (33%) C (34%), CD4 (55%), CD5 (72%), CD6 (22%), CD7 (77%)
Mutatsiooniprofiil
G -> A mutatsioon p53 geeni koodonis 248, P53 ei ekspresseeru (Rodrigues, 1990).
Viirused
Rakud ei tooda immunoglobuliini ega Epstein-Barri viirust (Minowada, 1972).
Tooted
Tekib suures koguses terminaalset desoksünukleotidüültransferaasi (TdT)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Kultuuri edasikasvatamine
Säilitage kultuure, lisades või asendades perioodiliselt kasvukeskkonda. Alustage kultuuride kasvatamist tihedusega 5 x 105 rakku/ml ja hoidke rakkude kontsentratsioon vahemikus 3 x 105 kuni 1 x 106 rakku/ml optimaalse kasvu tagamiseks.
Külvitihedus
1 x 105 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
24 kuni 48 tundi
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
19 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia