İçeriğe atla
MOLT-4 Hücreleri
Doku
Periferik kan
Hastalık
Yetişkin T akut lenfoblastik lösemi
Eş anlamlılar
Molt-4, MOLT 4, Molt 4, MOLT.4, MOLT4, Molt4, GM02219, GM02219C, GM2219C, GM02219D

MOLT-4 Hücreleri

Cell line · Ürün numarası 300115

MOLT-4, ...'da nüks eden Akut lenfoblastik lösemi (ALL) hastası 19 yaşındaki bir erkek hastanın periferik kanından elde edilen bir T lenfoblast hücre hattıdır...

€430.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

MOLT-4, 1971 yılında nükseden Akut lenfoblastik lösemili (ALL) 19 yaşındaki bir erkek hastanın periferik kanından elde edilen bir T lenfoblast hücre hattıdır. MOLT-3'ün kardeş hücre hattıdır, MOLT-4 ise alışılmadık bir T-hücresi antijen reseptörü gama zinciri geni (T-gama) yeniden düzenlemesi gösterir. MOLT-4 hücreleri yaklaşık 30 saatlik bir ikiye katlanma süresine sahiptir, süspansiyon halinde büyür ve tedavi edilmemiş çıplak farelerde, anti-lenfosit serumu ile tedavi edilmiş farelerde ve x-ışınına maruz bırakılmış farelerde tümörijeniktir.

MOLT-4 hücreleri hipertetraploid kromozom sayısına sahiptir ve hücrelerin %24'ünde 95 modal kromozom sayısı görülür ancak kromozomlarda kararlı ve tekrarlayan yapısal anormallikler ve daha uzun telomer uzunluğu gösterir. MOLT-4, CD1, CD2, CD3A, CD3B, CD3C, CD4, CD5, CD6 ve CD7 dahil olmak üzere çeşitli T hücresi belirteçlerini ifade eder. Ayrıca yüksek düzeyde terminal deoksinükleotidil transferaz (TdT) eksprese ederler.

MOLT-4 hücre hattı immünoglobulin veya Epstein-Barr virüsü üretmez. Hücrelerin türetildiği hasta daha önce çok ilaçlı kemoterapi almıştır. P53 geninin 248. kodonunda bir G -> A mutasyonu vardır ve P53 ifade edilmemektedir. Hat başlangıçta mikoplazma ile kontamine olmuş ancak o zamandan beri antibiyotiklerle tedavi edilmiştir.

Doku
Periferik kan
Hastalık
Yetişkin T akut lenfoblastik lösemi
Eş anlamlılar
  • Molt-4
  • MOLT 4
  • Molt 4
  • MOLT.4
  • MOLT4
  • Molt4
  • GM02219
  • GM02219C
  • GM2219C
  • GM02219D

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Askıya alma
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Yuvarlak hücreler
Hücre türü
T lenfosit
Karyotip
Hipertetraploid. Modal sayı: 96. İki x ve iki Y kromozomu.

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
MOLT-4 (Cytion katalog numarası 300115)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_0013

05İfade ve duyarlılık

Protein ekspresyonu
P53 pozitif
Antijen ekspresyonu
CD1 (%49), CD2 (%35), CD3 A (%26) B (%33) C (%34), CD4 (%55), CD5 (%72), CD6 (%22), CD7 (%77)
Mutasyon profili
P53 geninin 248. kodonundaki G -> A mutasyonu, P53'ün ifade edilmemesine neden olur (Rodrigues, 1990).
Virüsler
Hücreler immünoglobulin veya Epstein-Barr virüsü üretmez (Minowada, 1972).
Ürünler
Yüksek seviyelerde terminal deoksinükleotidil transferaz (TdT) üretilir

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
RPMI 1640, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w: 2.0 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820700a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Alt kültür oluşturma
Kültürleri, besiyerini periyodik olarak ekleyerek veya değiştirerek muhafaza edin. Kültürleri 5 x 105 hücre/ml yoğunlukta başlatın ve optimal büyüme için hücre konsantrasyonunu 3 x 105 ila 1 x 106 hücre/ml aralığında tutun.
Ekim yoğunluğu
1 x 105 hücre/cm2
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözülme sonrası toparlanma
24 ila 48 saat
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
19 yıl
Etnik köken
Kafkas