Ga naar de inhoud
MOLT-4 Cellen
Weefsel
Perifeer bloed
Ziekte
Volwassen T acute lymfoblastaire leukemie
Synoniemen
Molt-4, MOLT 4, Molt 4, MOLT.4, MOLT4, Molt4, GM02219, GM02219C, GM2219C, GM02219D

Documenten

MOLT-4 Cellen

Cell line · Productnummer 300115

MOLT-4 is een T-lymfoblastcellijn die is afgeleid van het perifere bloed van een 19-jarige mannelijke patiënt met acute lymfatische leukemie (ALL) in recidief in ...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

MOLT-4 is een T-lymfoblastcellijn afkomstig uit het perifere bloed van een 19-jarige mannelijke patiënt met acute lymfoblastaire leukemie (ALL) in 1971. Het is een zustercellijn van MOLT-3, terwijl MOLT-4 een ongebruikelijke T-cel antigeen receptor gamma-keten gen (T-gamma) herschikking laat zien. MOLT-4-cellen hebben een verdubbelingstijd van ongeveer 30 uur, groeien in suspensie en zijn tumorigeen in onbehandelde naaktmuizen, met antilymfocytenserum behandelde muizen en x-bestraalde muizen.

MOLT-4-cellen hebben een hypertetraploïd chromosoomnummer met een modaal chromosoomnummer van 95 dat voorkomt in 24% van de cellen, maar vertonen stabiele en terugkerende structurele afwijkingen van chromosomen en een langere telomeerlengte. MOLT-4 brengt verschillende T-cel markers tot expressie, waaronder CD1, CD2, CD3A, CD3B, CD3C, CD4, CD5, CD6 en CD7. Ze brengen ook veel terminal deoxynucleotidyl transferase (TdT) tot expressie.

De MOLT-4 cellijn produceert geen immunoglobuline of Epstein-Barr virus. De patiënt van wie de cellen afkomstig zijn, heeft eerder multidrug-chemotherapie gehad. Er is een G -> A-mutatie bij codon 248 van het p53-gen en P53 komt niet tot expressie. De lijn was aanvankelijk besmet met mycoplasma, maar is sindsdien genezen met antibiotica.

Weefsel
Perifeer bloed
Ziekte
Volwassen T acute lymfoblastaire leukemie
Synoniemen
  • Molt-4
  • MOLT 4
  • Molt 4
  • MOLT.4
  • MOLT4
  • Molt4
  • GM02219
  • GM02219C
  • GM2219C
  • GM02219D

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Ophanging
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Ronde cellen
Celtype
T-lymfocyt
Karyotype
Hypertetraploïd. Modaal aantal: 96. Twee x- en twee Y-chromosomen.

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
MOLT-4 (Cytion catalogusnummer 300115)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0013

05Expressie en vatbaarheid

Eiwit-expressie
P53-positief
Antigeenexpressie
CD1 (49%), CD2 (35%), CD3 A (26%) B (33%) C (34%), CD4 (55%), CD5 (72%), CD6 (22%), CD7 (77%)
Mutatieprofiel
G -> A mutatie in codon 248 van het p53-gen, komt P53 niet tot expressie (Rodrigues, 1990).
Virussen
De cellen produceren geen immunoglobuline of Epstein-Barr virus (Minowada, 1972).
Producten
Hoge niveaus van terminal deoxynucleotidyl transferase (TdT) worden geproduceerd

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Heruitplanten
Onderhoud de culturen door het medium periodiek toe te voegen of te vervangen. Start de culturen met een dichtheid van 5 x 105 cellen/ml en houd de celconcentratie binnen het bereik van 3 x 105 tot 1 x 106 cellen/ml voor een optimale groei.
Zaaidichtheid
1 x 105 cellen/cm2
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Herstel na ontdooiing
24 tot 48 uur
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
19 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch