Gå direkte til indholdet
MOLT-4-celler
Væv
Perifert blod
Sygdom
Voksen T akut lymfoblastisk leukæmi
Synonymer
Molt-4, MOLT 4, Molt 4, MOLT.4, MOLT4, Molt4, GM02219, GM02219C, GM2219C, GM02219D

Dokumenter

MOLT-4-celler

Cell line · Varenummer 300115

MOLT-4 er en T-lymfoblast-cellelinje, der stammer fra det perifere blod hos en 19-årig mandlig patient med akut lymfoblastisk leukæmi (ALL) i tilbagefald i ...

€430.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

MOLT-4 er en T-lymfoblastcellelinje, der stammer fra perifert blod fra en 19-årig mandlig patient med akut lymfoblastisk leukæmi (ALL) i tilbagefald i 1971. Det er en søstercellelinje til MOLT-3, mens MOLT-4 viser et usædvanligt T-celle antigen receptor gamma-kæde gen (T-gamma) rearrangement. MOLT-4-celler har en fordoblingstid på omkring 30 timer, vokser i suspension og er tumorigeniske i ubehandlede nøgne mus, mus behandlet med anti-lymfocyt-serum og x-bestrålede mus.

MOLT-4-celler har et hypertetraploidt kromosomtal med et modalt kromosomtal på 95, der forekommer i 24 % af cellerne, men viser stabile og tilbagevendende strukturelle abnormiteter i kromosomerne og længere telomerlængde. MOLT-4 udtrykker en række T-cellemarkører, herunder CD1, CD2, CD3A, CD3B, CD3C, CD4, CD5, CD6 og CD7. De udtrykker også høje niveauer af terminal deoxynukleotidyltransferase (TdT).

MOLT-4-cellelinjen producerer ikke immunglobulin eller Epstein-Barr-virus. Patienten, som cellerne stammer fra, havde tidligere fået kemoterapi med flere stoffer. Der er en G -> A-mutation ved codon 248 i p53-genet, og P53 udtrykkes ikke. Linjen var oprindeligt kontamineret med mycoplasma, men er siden blevet kureret med antibiotika.

Væv
Perifert blod
Sygdom
Voksen T akut lymfoblastisk leukæmi
Synonymer
  • Molt-4
  • MOLT 4
  • Molt 4
  • MOLT.4
  • MOLT4
  • Molt4
  • GM02219
  • GM02219C
  • GM2219C
  • GM02219D

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Affjedring
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Runde celler
Celletype
T-lymfocyt
Karyotype
Hypertetraploid. Modaltal: 96. To x- og to Y-kromosomer.

04Identifikatorer

Kildehenvisning
MOLT-4 (Cytion katalognummer 300115)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0013

05Udtryk og modtagelighed

Proteinekspression
P53-positiv
Antigenudtryk
CD1 (49 %), CD2 (35 %), CD3 A (26 %) B (33 %) C (34 %), CD4 (55 %), CD5 (72 %), CD6 (22 %), CD7 (77 %)
Mutationsprofil
G -> A-mutation ved codon 248 i p53-genet, udtrykkes P53 ikke (Rodrigues, 1990).
Vira
Cellerne producerer ikke immunglobulin eller Epstein-Barr-virus (Minowada, 1972).
Produkter
Der produceres høje niveauer af terminal deoxynukleotidyltransferase (TdT)

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Oddyrkning
Vedligehold kulturerne ved regelmæssigt at tilføje eller udskifte mediet. Start kulturerne med en tæthed på 5 x 105 celler/ml og hold cellekoncentrationen inden for området 3 x 105 til 1 x 106 celler/ml for optimal vækst.
Såtæthed
1 x 105 celler/cm2
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Genopretning efter optøning
24 til 48 timer
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
19 år
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk