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Tissu
Poumon
Maladie
Adénocarcinome
Site métastatique
Ganglion lymphatique
Synonymes
H2009, H-2009, NCIH2009

Documents

NCI-H2009

Cell line · Référence du produit 305283

€0.00hors taxes et frais de port
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Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire NCI-H2009 est dérivée d'un carcinome pulmonaire non à petites cellules (CPNPC) humain, plus précisément d'un adénocarcinome. Cette lignée cellulaire est largement utilisée dans la recherche sur le cancer du poumon pour étudier les mécanismes moléculaires et cellulaires qui sous-tendent l'adénocarcinome, le sous-type le plus courant de CBNPC. Les cellules NCI-H2009 sont précieuses pour étudier les mutations génétiques, les voies de transduction des signaux et les réponses thérapeutiques associées à l'adénocarcinome pulmonaire.

Les cellules NCI-H2009 présentent une morphologie épithéliale et expriment des marqueurs caractéristiques de l'adénocarcinome pulmonaire, notamment les cytokératines et l'antigène carcinoembryonnaire (CEA). Ils présentent des altérations génétiques fréquemment observées dans les CBNPC, telles que des mutations du gène KRAS, qui joue un rôle central dans la signalisation, la croissance et la survie des cellules. Les chercheurs utilisent les cellules NCI-H2009 pour explorer les principales voies de signalisation impliquées dans la progression du cancer du poumon, telles que les voies EGFR, KRAS et PI3K/Akt. Ces cellules sont également utilisées dans des essais de criblage de médicaments à haut débit et dans des tests précliniques d'agents chimiothérapeutiques, de thérapies ciblées et d'immunothérapies. En outre, les cellules NCI-H2009 sont utilisées pour étudier les mécanismes de résistance aux médicaments et développer des stratégies pour les surmonter. La pertinence de la lignée cellulaire NCI-H2009 dans la recherche sur l'adénocarcinome pulmonaire souligne son importance pour faire progresser notre compréhension de la biologie du cancer du poumon et pour développer de nouvelles approches thérapeutiques plus efficaces pour les patients atteints de CPNPC.

Tissu
Poumon
Maladie
Adénocarcinome
Site métastatique
Ganglion lymphatique
Synonymes
  • H2009
  • H-2009
  • NCIH2009

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Femme
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
Épithéliale

04Identifiants

Référence
NCI-H2009 (numéro de catalogue Cytion 305283)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1514

05Expression et sensibilité

Profil mutationnel
Mutation : B2M, p.Met1Val (c.1A>G), hétérozygote ; Mutation : B2M, p.Gln28Ter (c.82C>T), hétérozygote ; Mutation : KRAS, p.Gly12Ala (c.35G>C), hétérozygote ; Mutation : TERT, c.1-124C>T (c.228C>T) (C228T) ; Mutation : TP53, p.Arg273Leu (c.818G>T), homozygote
Virus
Transformant : Virus d'Epstein-Barr (EBV)

06Manipulation et culture

Milieu de culture

Milieu HITES supplémenté

Le milieu de base pour cette lignée cellulaire est le DF12. Pour obtenir le milieu de culture complet, ajouter les composants suivants au milieu de base :

  • 0,005 mg/ml d'insuline
  • 0,01 mg/ml de transferrine
  • 30 nM de sélénite de sodium (concentration finale)
  • 10 nM d'hydrocortisone (concentration finale)
  • 10 nM de bêta-estradiol (concentration finale)
  • 2 mM supplémentaires de L-glutamine (pour une concentration finale de 4,5 mM)
  • 5 % de sérum fœtal bovin (concentration finale)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
68 ans
Origine ethnique
Européen