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Tissue
肺
Disease
腺癌
Metastatic site
淋巴結
Synonyms
H2009, H-2009, NCIH2009

Documents

NCI-H2009

Cell line · Product number 305283

US$550.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

NCI-H2009 細胞系源自人類非小細胞肺癌(NSCLC),具體而言為腺癌。該細胞系廣泛應用於肺癌研究,用於探究作為非小細胞肺癌最常見亞型的腺癌背後所涉及的分子與細胞機制。 NCI-H2009 細胞對於探究與肺腺癌相關的基因突變、訊號傳導路徑及治療反應具有重要價值。

NCI-H2009 細胞呈現上皮細胞形態,並表達肺腺癌的特徵性標記物,包括細胞角蛋白和癌胚抗原(CEA)。它們攜帶在非小細胞肺癌中常見的遺傳變異,例如 KRAS 基因的突變——該基因在細胞訊號傳導、生長及存活中扮演關鍵角色。 研究人員利用 NCI-H2009 細胞探索參與肺癌進展的關鍵訊號傳導路徑,例如 EGFR、KRAS 及 PI3K/Akt 路徑。這些細胞亦被應用於高通量藥物篩選試驗,以及化療藥物、標靶療法和免疫療法的臨床前測試。 此外,NCI-H2009 細胞亦被用於研究藥物抗藥性的機制,並開發克服抗藥性的策略。NCI-H2009 細胞系在肺腺癌研究中的相關性,凸顯了其在深化我們對肺癌生物學的理解,以及為非小細胞肺癌(NSCLC)患者開發嶄新且更有效治療方法方面的關鍵重要性。

Tissue
肺
Disease
腺癌
Metastatic site
淋巴結
Synonyms
  • H2009
  • H-2009
  • NCIH2009

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
上皮性

04Identifiers

Citation
NCI-H2009(Cytion 型號 305283)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1514

05Expression and susceptibility

Mutational profile
突變:B2M,p.Met1Val (c.1A>G),雜合子;突變:B2M,p.Gln28Ter (c.82C>T),雜合子; 突變:KRAS,p.Gly12Ala (c.35G>C),雜合子;突變:TERT,c.1-124C>T (c.228C>T) (C228T); 突變:TP53,p.Arg273Leu (c.818G>T),純合子
Viruses
轉化體:愛潑斯坦-巴爾病毒(EBV)

06Handling and culture

Culture medium

添加成分的 HITES 培養基

此細胞系的基礎培養基為 DF12。欲製備完整的生長培養基, 請向基礎培養基中加入以下成分:

  • 0.005 mg/ml 胰島素
  • 0.01 毫克/毫升 轉鐵蛋白
  • 30 nM 亞硒酸鈉(最終濃度)
  • 10 nM 氫化可的松(最終濃度)
  • 10 nM β-雌二醇(最終濃度)
  • 額外添加 2 mM L-谷氨醯胺(以達到最終濃度 4.5 mM)
  • 5% 胎牛血清(最終濃度)
Incubation atmosphere

37°C,5% CO₂,加濕環境。

Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
Fluid renewal
每週 2 至 3 次
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

Freeze medium
作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
Storage conditions

若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。

Shipping conditions

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

08Donor

Donor age
68年
Ethnicity
歐洲的