Pāriet uz saturu
Audums
Plaušas
Slimība
Adenokarcinoma
Metastāžu vieta
Limfmezgls
Sinonīmi
H2009, H-2009, NCIH2009

Dokumenti

NCI-H2009

Cell line · Preces numurs 305283

€0.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

NCI-H2009 šūnu līnija ir iegūta no cilvēka nesīkšūnu plaušu karcinomas (NSCLC), konkrēti adenokarcinomas. Šī šūnu līnija tiek plaši izmantota plaušu vēža pētījumos, lai izpētītu molekulāros un šūnu mehānismus, kas ir adenokarcinomas, visizplatītākā NSCLC apakštipa, pamatā. NCI-H2009 šūnas ir vērtīgas, pētot ģenētiskās mutācijas, signālu pārneses ceļus un terapeitiskās reakcijas, kas saistītas ar plaušu adenokarcinomu.

NCI-H2009 šūnas uzrāda epitēlija morfoloģiju un izsaka plaušu adenokarcinomai raksturīgos marķierus, tostarp citokeratīnus un karcinoembrionālo antigēnu (CEA). Tās satur ģenētiskas izmaiņas, kas bieži novērotas NSCLC, piemēram, mutācijas KRAS gēnā, kas ir būtisks šūnu signālu pārraides, augšanas un izdzīvošanas procesā. Pētnieki izmanto NCI-H2009 šūnas, lai pētītu galvenos signālu pārneses ceļus, kas iesaistīti plaušu vēža progresēšanā, piemēram, EGFR, KRAS un PI3K/Akt ceļus. Šīs šūnas tiek izmantotas arī augstas caurlaidspējas zāļu skrīninga testos un ķīmijterapijas līdzekļu, mērķtiecīgas terapijas un imūnterapijas pirmsklīniskajos testos. Turklāt NCI-H2009 šūnas tiek izmantotas, lai pētītu zāļu rezistences mehānismus un izstrādātu stratēģijas to pārvarēšanai. NCI-H2009 šūnu līnijas nozīme plaušu adenokarcinomas pētījumos uzsver tās svarīgumu, lai padziļinātu mūsu izpratni par plaušu vēža bioloģiju un izstrādātu jaunus un efektīvākus ārstēšanas paņēmienus pacientiem ar NSCLC.

Audums
Plaušas
Slimība
Adenokarcinoma
Metastāžu vieta
Limfmezgls
Sinonīmi
  • H2009
  • H-2009
  • NCIH2009

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija

04Identifikatori

Atsauce
NCI-H2009 (Cytion kataloga numurs 305283)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1514

05Pazīmes un uzņēmība

Mutāciju profils
Mutācija: B2M, p.Met1Val (c.1A>G), heterozigota; Mutācija: B2M, p.Gln28Ter (c.82C>T), heterozigota; Mutācija: KRAS, p.Gly12Ala (c.35G>C), heterozigota; Mutācija: TERT, c.1-124C>T (c.228C>T) (C228T); Mutācija: TP53, p.Arg273Leu (c.818G>T), homozigota
Vīrusi
Transformants: Epšteina-Barra vīruss (EBV)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne

HITES barotne ar piedevām

Šīs šūnu līnijas pamatbarotne ir DF12. Lai izveidotu pilnīgu augšanas barotni, pamatbarotnei pievienojiet šādus komponentus:

  • 0,005 mg/ml insulīns
  • 0,01 mg/ml transferīns
  • 30 nM Nātrija selenīts (galīgā koncentrācija)
  • 10 nM Hidrokortizons (galīgā koncentrācija)
  • 10 nM beta-estradiols (galīgā koncentrācija)
  • Papildus 2 mM L-glutamīns (galīgajai koncentrācijai 4,5 mM)
  • 5 % teļa serums (galīgā koncentrācija)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
68 gadi
Etniskā piederība
Eiropas