Přejít na obsah
Tkáň
Plíce
Nemoc
Adenokarcinom
Místo metastázy
Lymfatická uzlina
Synonyma
H2009, H-2009, NCIH2009

Dokumenty

NCI-H2009

Cell line · Číslo výrobku 305283

€0.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie NCI-H2009 je odvozena od lidského nemalobuněčného karcinomu plic (NSCLC), konkrétně adenokarcinomu. Tato buněčná linie se hojně využívá ve výzkumu rakoviny plic ke studiu molekulárních a buněčných mechanismů, které jsou základem adenokarcinomu, nejčastějšího podtypu NSCLC. Buňky NCI-H2009 jsou cenné pro zkoumání genetických mutací, signálních transdukčních drah a terapeutických odpovědí spojených s adenokarcinomem plic.

Buňky NCI-H2009 vykazují epiteliální morfologii a exprimují markery charakteristické pro plicní adenokarcinom, včetně cytokeratinů a karcinoembryonálního antigenu (CEA). Obsahují genetické změny často pozorované u NSCLC, například mutace v genu KRAS, který je klíčový pro buněčnou signalizaci, růst a přežití. Výzkumníci využívají buňky NCI-H2009 ke zkoumání klíčových signálních drah, které se podílejí na progresi rakoviny plic, jako jsou dráhy EGFR, KRAS a PI3K/Akt. Tyto buňky se také používají při vysoce výkonných testech screeningu léčiv a předklinickém testování chemoterapeutických látek, cílených terapií a imunoterapií. Kromě toho se buňky NCI-H2009 používají ke studiu mechanismů rezistence vůči lékům a k vývoji strategií k jejímu překonání. Význam buněčné linie NCI-H2009 ve výzkumu plicního adenokarcinomu podtrhuje její důležitost při prohlubování našich znalostí biologie plicního karcinomu a při vývoji nových a účinnějších léčebných postupů pro pacienty s NSCLC.

Tkáň
Plíce
Nemoc
Adenokarcinom
Místo metastázy
Lymfatická uzlina
Synonyma
  • H2009
  • H-2009
  • NCIH2009

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelové

04Identifikátory

Citace
NCI-H2009 (katalogové číslo Cytion 305283)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1514

05Exprese a náchylnost

Mutační profil
Mutace: B2M, p.Met1Val (c.1A>G), heterozygous; Mutation: B2M, p.Gln28Ter (c.82C>T), heterozygotní; Mutace: B2M, p.Gln28Ter (c.82C>T), heterozygotní: KRAS, p.Gly12Ala (c.35G>C), heterozygotní; Mutace: p.Gly12Ala (c.35G>C), heterozygotní: TERT, c.1-124C>T (c.228C>T) (C228T); mutace: TP53, p.Arg273Leu (c.818G>T), homozygotní
Viry
Transformant: Epstein-Barrové (EBV)

06Manipulace a chov

Pěstovací médium

Doplněné médium HITES

Základním médiem pro tuto buněčnou linii je DF12. Pro přípravu kompletního růstového média přidejte do základního média následující složky:

  • 0,005 mg/ml inzulínu
  • 0,01 mg/ml transferrin
  • 30 nM seleničitan sodný (konečná koncentrace)
  • 10 nM hydrokortizon (konečná koncentrace)
  • 10 nM beta-estradiol (konečná koncentrace)
  • Extra 2 mM L-glutamin (pro konečnou koncentraci 4,5 mM)
  • 5 % fetální bovinní sérum (konečná koncentrace)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
68 let
Etnická příslušnost
Evropská