İçeriğe atla
Doku
Akciğer
Hastalık
Adenokarsinom
Metastaz yeri
Lenf düğümü
Eş anlamlılar
H2009, H-2009, NCIH2009

NCI-H2009

Cell line · Ürün numarası 305283

€0.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

NCI-H2009 hücre hattı, insan küçük hücreli dışı akciğer kanseri (NSCLC), özellikle adenokarsinomdan türetilmiştir. Bu hücre hattı, NSCLC'nin en yaygın alt tipi olan adenokarsinomun altında yatan moleküler ve hücresel mekanizmaları incelemek için akciğer kanseri araştırmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. NCI-H2009 hücreleri, akciğer adenokarsinomu ile ilişkili genetik mutasyonları, sinyal iletim yollarını ve terapötik yanıtları araştırmak için değerlidir.

NCI-H2009 hücreleri, epitelyal morfoloji sergiler ve sitokeratinler ve karsinoembriyonik antijen (CEA) dahil olmak üzere akciğer adenokarsinomuna özgü belirteçleri ifade eder. Hücre sinyalleşmesi, büyümesi ve hayatta kalmasında önemli rol oynayan KRAS genindeki mutasyonlar gibi, NSCLC'de sıklıkla gözlenen genetik değişiklikleri barındırırlar. Araştırmacılar, EGFR, KRAS ve PI3K/Akt yolakları gibi akciğer kanseri ilerlemesinde rol oynayan önemli sinyal yolaklarını araştırmak için NCI-H2009 hücrelerini kullanmaktadır. Bu hücreler ayrıca yüksek verimli ilaç tarama testlerinde ve kemoterapötik ajanların, hedefe yönelik tedavilerin ve immünoterapilerin preklinik testlerinde de kullanılmaktadır. Ayrıca, NCI-H2009 hücreleri, ilaç direncinin mekanizmalarını araştırmak ve bunu aşmak için stratejiler geliştirmek amacıyla da kullanılmaktadır. NCI-H2009 hücre hattının akciğer adenokarsinomu araştırmalarındaki önemi, akciğer kanseri biyolojisi hakkındaki bilgimizi ilerletmede ve NSCLC hastaları için yeni ve daha etkili tedavi yaklaşımları geliştirmede önemini vurgulamaktadır.

Doku
Akciğer
Hastalık
Adenokarsinom
Metastaz yeri
Lenf düğümü
Eş anlamlılar
  • H2009
  • H-2009
  • NCIH2009

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitelyal

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
NCI-H2009 (Cytion katalog numarası 305283)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_1514

05İfade ve duyarlılık

Mutasyon profili
Mutasyon: B2M, p.Met1Val (c.1A>G), heterozigot; Mutasyon: B2M, p.Gln28Ter (c.82C>T), heterozigot; Mutasyon: KRAS, p.Gly12Ala (c.35G>C), heterozigot; Mutasyon: TERT, c.1-124C>T (c.228C>T) (C228T); Mutasyon: TP53, p.Arg273Leu (c.818G>T), homozigot
Virüsler
Transformant: Epstein-Barr virüsü (EBV)

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri

HITES besiyeri takviyesi

Bu hücre hattının temel besiyeri DF12'dir. Tam besiyeri hazırlamak için, temel besiyerine aşağıdaki bileşenleri ekleyin:

  • 0,005 mg/ml İnsülin
  • 0,01 mg/ml Transferrin
  • 30 nM Sodyum selenit (nihai konsantrasyon)
  • 10 nM Hidrokortizon (nihai konsantrasyon)
  • 10 nM beta-östradiol (nihai konsantrasyon)
  • Ekstra 2 mM L-glutamin (4,5 mM nihai konsantrasyon için)
  • %5 fetal sığır serumu (nihai konsantrasyon)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
68 yıl
Etnik köken
Avrupa