Skip to content
Tissue
ריאה
Disease
אדנוקרצינומה
Metastatic site
בלוטת לימפה
Synonyms
H2009, H-2009, NCIH2009

Documents

NCI-H2009

Cell line · Product number 305283

US$550.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים NCI-H2009 נגזר מסרטן ריאות לא קטן תאים (NSCLC) בבני אדם, ובאופן ספציפי מאדנוקרצינומה. קו תאים זה נמצא בשימוש נרחב במחקר סרטן הריאות לחקר המנגנונים המולקולריים והתאיים העומדים בבסיס האדנוקרצינומה, הסוג הנפוץ ביותר של NSCLC. תאי NCI-H2009 חשובים לחקר מוטציות גנטיות, מסלולי העברת אותות ותגובות טיפוליות הקשורות לאדנוקרצינומה של הריאה.

תאי NCI-H2009 מציגים מורפולוגיה אפיתלית ומבטאים סמנים האופייניים לאדנוקרצינומה של הריאה, כולל ציטוקרטין ואנטיגן קרצינו-עוברי (CEA). הם נושאים שינויים גנטיים הנצפים לעתים קרובות ב-NSCLC, כגון מוטציות בגן KRAS, המהווה מרכיב מרכזי באיתות, גדילה והישרדות תאים. חוקרים משתמשים בתאי NCI-H2009 כדי לחקור מסלולי איתות מרכזיים המעורבים בהתקדמות סרטן הריאה, כגון מסלולי EGFR, KRAS ו-PI3K/Akt. תאים אלה משמשים גם בבדיקות סקר תרופות בתפוקה גבוהה ובבדיקות פרה-קליניות של חומרים כימותרפיים, טיפולים ממוקדים ואימונותרפיות. בנוסף, תאי NCI-H2009 משמשים לחקר מנגנוני עמידות לתרופות ולפיתוח אסטרטגיות להתגברות עליהם. הרלוונטיות של קו התאים NCI-H2009 במחקר אדנוקרצינומה של הריאה מדגישה את חשיבותו בקידום ההבנה שלנו לגבי הביולוגיה של סרטן הריאה ובפיתוח גישות טיפול חדשות ויעילות יותר עבור חולים עם NSCLC.

Tissue
ריאה
Disease
אדנוקרצינומה
Metastatic site
בלוטת לימפה
Synonyms
  • H2009
  • H-2009
  • NCIH2009

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
אפיתל

04Identifiers

Citation
NCI-H2009 (מספר קטלוגי Cytion 305283)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1514

05Expression and susceptibility

Mutational profile
מוטציה: B2M, p.Met1Val (c.1A>G), הטרוזיגוטי; מוטציה: B2M, p.Gln28Ter (c.82C>T), הטרוזיגוטי; מוטציה: KRAS, p.Gly12Ala (c.35G>C), הטרוזיגוטי; מוטציה: TERT, c.1-124C>T (c.228C>T) (C228T); מוטציה: TP53, p.Arg273Leu (c.818G>T), הומוזיגוטי
Viruses
טרנספורמנט: נגיף אפשטיין-בר (EBV)

06Handling and culture

Culture medium

תמיסת HITES משלימה

המדיום הבסיסי עבור קו תאים זה הוא DF12. כדי להכין את המדיום המלא, הוסף את המרכיבים הבאים למדיום הבסיסי:

  • 0.005 מ"ג/מ"ל אינסולין
  • 0.01 מ"ג/מ"ל טרנספרין
  • 30 ננומטר סלניט נתרן (ריכוז סופי)
  • 10 ננומטר הידרוקורטיזון (ריכוז סופי)
  • 10 ננומטר בטא-אסטרדיול (ריכוז סופי)
  • 2 mM L-גלוטמין נוסף (לריכוז סופי של 4.5 mM)
  • 5% סרום עגלי (ריכוז סופי)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
68 שנים
Ethnicity
אירופאי