Перейти до вмісту
Тканина
Легені
Хвороба
Аденокарцинома
Місце метастазування
Лімфатичний вузол
Синоніми
H2009, H-2009, NCIH2009

Документи

NCI-H2009

Cell line · Номер товару 305283

€0.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

Клітинна лінія NCI-H2009 походить від недрібноклітинного раку легенів (НДРЛ) людини, а саме від аденокарциноми. Ця клітинна лінія широко використовується в дослідженнях раку легенів для вивчення молекулярних і клітинних механізмів, що лежать в основі аденокарциноми, найпоширенішого підтипу НДРЛ. Клітини NCI-H2009 є цінними для дослідження генетичних мутацій, шляхів передачі сигналів та терапевтичних реакцій, пов'язаних з аденокарциномою легенів.

Клітини NCI-H2009 мають епітеліальну морфологію та експресують маркери, характерні для аденокарциноми легенів, включаючи цитокератини та карциноембріональний антиген (CEA). Вони містять генетичні зміни, які часто спостерігаються при НДРЛ, такі як мутації в гені KRAS, який відіграє ключову роль у клітинній сигналізації, рості та виживанні. Дослідники використовують клітини NCI-H2009 для вивчення ключових сигнальних шляхів, що беруть участь у прогресуванні раку легенів, таких як шляхи EGFR, KRAS та PI3K/Akt. Ці клітини також використовуються в високопродуктивних аналізах скринінгу лікарських засобів та доклінічних випробуваннях хіміотерапевтичних агентів, цільових терапій та імунотерапій. Крім того, клітини NCI-H2009 використовуються для вивчення механізмів резистентності до лікарських засобів та розробки стратегій її подолання. Актуальність клітинної лінії NCI-H2009 у дослідженні аденокарциноми легенів підкреслює її важливість у поглибленні нашого розуміння біології раку легенів та у розробці нових і більш ефективних підходів до лікування пацієнтів з НДРКЛ.

Тканина
Легені
Хвороба
Аденокарцинома
Місце метастазування
Лімфатичний вузол
Синоніми
  • H2009
  • H-2009
  • NCIH2009

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Жінка
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Епітеліальний

04Ідентифікатори

Посилання
NCI-H2009 (номер у каталозі Cytion 305283)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_1514

05Експресія та сприйнятливість

Профіль мутацій
Мутація: B2M, p.Met1Val (c.1A>G), гетерозиготна; Мутація: B2M, p.Gln28Ter (c.82C>T), гетерозиготна; Мутація: KRAS, p.Gly12Ala (c.35G>C), гетерозиготна; Мутація: TERT, c.1-124C>T (c.228C>T) (C228T); Мутація: TP53, p.Arg273Leu (c.818G>T), гомозиготна
Віруси
Трансформер: Вірус Епштейна-Барр (EBV)

06Обробка та вирощування

Живильне середовище

Доповнена середа HITES

Базовим середовищем для цієї клітинної лінії є DF12. Щоб отримати повне середовище для росту, додайте до базового середовища наступні компоненти:

  • 0,005 мг/мл інсуліну
  • 0,01 мг/мл трансферин
  • 30 нМ селеніт натрію (кінцева концентрація)
  • 10 нМ гідрокортизон (кінцева концентрація)
  • 10 нМ бета-естрадіол (кінцева концентрація)
  • Додатково 2 мМ L-глутамін (для кінцевої концентрації 4,5 мМ)
  • 5% ембріональна сироватка великої рогатої худоби (кінцева концентрація)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Оновлення рідини
2-3 рази на тиждень
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Вік донора
68 років
Етнічна приналежність
Європейський

Вам також може знадобитися