Gå direkte til indholdet
Væv
Lunge
Sygdom
Adenokarcinom
Metastasested
Lymfeknude
Synonymer
H2009, H-2009, NCIH2009

Dokumenter

NCI-H2009

Cell line · Varenummer 305283

€0.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

NCI-H2009-cellelinjen stammer fra et humant ikke-småcellet lungekræft (NSCLC), nærmere bestemt et adenokarcinom. Denne cellelinje bruges i vid udstrækning i lungekræftforskning til at undersøge de molekylære og cellulære mekanismer, der ligger til grund for adenokarcinom, den mest almindelige undertype af NSCLC. NCI-H2009-celler er værdifulde til undersøgelse af genetiske mutationer, signaltransduktionsveje og terapeutiske responser forbundet med lungeadenokarcinom.

NCI-H2009-celler udviser en epitelial morfologi og udtrykker markører, der er karakteristiske for lungeadenokarcinom, herunder cytokeratiner og carcinoembryonalt antigen (CEA). De rummer genetiske ændringer, der ofte observeres i NSCLC, såsom mutationer i KRAS-genet, som er afgørende for cellesignalering, vækst og overlevelse. Forskere bruger NCI-H2009-celler til at undersøge vigtige signalveje, der er involveret i lungekræftprogression, såsom EGFR-, KRAS- og PI3K/Akt-vejene. Disse celler anvendes også i højkapacitetslægemiddelscreeningsassays og prækliniske test af kemoterapeutiske midler, målrettede terapier og immunterapier. Derudover bruges NCI-H2009-celler til at undersøge mekanismer for lægemiddelresistens og til at udvikle strategier til at overvinde denne. Relevansen af NCI-H2009-cellelinjen i forskning i lungeadenokarcinom understreger dens betydning for at fremme vores forståelse af lungekræftbiologi og for at udvikle nye og mere effektive behandlingsmetoder for patienter med NSCLC.

Væv
Lunge
Sygdom
Adenokarcinom
Metastasested
Lymfeknude
Synonymer
  • H2009
  • H-2009
  • NCIH2009

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitelial

04Identifikatorer

Kildehenvisning
NCI-H2009 (Cytion-katalognummer 305283)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1514

05Udtryk og modtagelighed

Mutationsprofil
Mutation: B2M, p.Met1Val (c.1A>G), heterozygot; Mutation: B2M, p.Gln28Ter (c.82C>T), heterozygot; Mutation: KRAS, p.Gly12Ala (c.35G>C), heterozygot; Mutation: TERT, c.1-124C>T (c.228C>T) (C228T); Mutation: TP53, p.Arg273Leu (c.818G>T), homozygot
Vira
Transformant: Epstein-Barr-virus (EBV)

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium

HITES-medium tilsat

Basismediet for denne cellelinje er DF12. For at fremstille det komplette vækstmedium skal følgende komponenter tilsættes basismediet:

  • 0,005 mg/ml insulin
  • 0,01 mg/ml transferrin
  • 30 nM Natriumselenit (endelig koncentration)
  • 10 nM Hydrocortison (endelig koncentration)
  • 10 nM beta-østradiol (endelig koncentration)
  • Ekstra 2 mM L-glutamin (til endelig koncentration på 4,5 mM)
  • 5 % føtal bovint serum (slutkoncentration)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
68 år
Etnisk tilhørsforhold
Europæisk