Skip to content
Tissue
Phổi
Disease
Ung thư biểu mô tuyến
Metastatic site
Hạch bạch huyết
Synonyms
H2009, H-2009, NCIH2009

Documents

NCI-H2009

Cell line · Product number 305283

€0.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Dòng tế bào NCI-H2009 được phân lập từ một khối u phổi không phải tế bào nhỏ (NSCLC) ở người, cụ thể là một khối u phổi dạng tuyến. Dòng tế bào này được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu ung thư phổi để nghiên cứu các cơ chế phân tử và tế bào cơ bản của khối u phổi dạng tuyến, loại ung thư phổi phổ biến nhất trong nhóm NSCLC. Tế bào NCI-H2009 có giá trị trong việc nghiên cứu các đột biến gen, con đường truyền tín hiệu và phản ứng điều trị liên quan đến ung thư phổi dạng tuyến.

Tế bào NCI-H2009 có hình thái biểu mô và biểu hiện các dấu hiệu đặc trưng của ung thư phổi dạng tuyến, bao gồm cytokeratins và kháng nguyên ung thư phôi (CEA). Chúng mang các đột biến di truyền thường gặp trong NSCLC, như đột biến gen KRAS, có vai trò quan trọng trong tín hiệu tế bào, tăng trưởng và sự sống còn. Các nhà nghiên cứu sử dụng tế bào NCI-H2009 để khám phá các con đường tín hiệu chính liên quan đến sự tiến triển của ung thư phổi, như con đường EGFR, KRAS và PI3K/Akt. Các tế bào này cũng được sử dụng trong các thử nghiệm sàng lọc thuốc quy mô lớn và thử nghiệm tiền lâm sàng của các tác nhân hóa trị, liệu pháp nhắm mục tiêu và liệu pháp miễn dịch. Ngoài ra, tế bào NCI-H2009 được sử dụng để nghiên cứu cơ chế kháng thuốc và phát triển các chiến lược để vượt qua nó. Sự quan trọng của dòng tế bào NCI-H2009 trong nghiên cứu ung thư phổi dạng tuyến nhấn mạnh vai trò của nó trong việc nâng cao hiểu biết về sinh học ung thư phổi và phát triển các phương pháp điều trị mới và hiệu quả hơn cho bệnh nhân ung thư phổi không tế bào nhỏ (NSCLC).

Tissue
Phổi
Disease
Ung thư biểu mô tuyến
Metastatic site
Hạch bạch huyết
Synonyms
  • H2009
  • H-2009
  • NCIH2009

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Thượng bì

04Identifiers

Citation
NCI-H2009 (Số catalog Cytion 305283)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1514

05Expression and susceptibility

Mutational profile
Biến đổi gen: B2M, p.Met1Val (c.1A>G), dị hợp tử; Biến đổi gen: B2M, p.Gln28Ter (c.82C>T), dị hợp tử; Biến đổi gen: KRAS, p.Gly12Ala (c.35G>C), dị hợp tử; Biến dị: TERT, c.1-124C>T (c.228C>T) (C228T); Biến dị: TP53, p.Arg273Leu (c.818G>T), đồng hợp tử
Viruses
Biến thể: Virus Epstein-Barr (EBV)

06Handling and culture

Culture medium

HITES môi trường bổ sung

Môi trường cơ bản cho dòng tế bào này là DF12. Để tạo ra môi trường nuôi cấy hoàn chỉnh, thêm các thành phần sau vào môi trường cơ bản:

  • 0,005 mg/ml Insulin
  • 0,01 mg/ml Transferrin
  • 30 nM Natri selenit (nồng độ cuối cùng)
  • 10 nM Hydrocortisone (nồng độ cuối cùng)
  • 10 nM beta-estradiol (nồng độ cuối cùng)
  • Thêm 2 mM L-glutamine (để đạt nồng độ cuối cùng 4,5 mM)
  • 5% huyết thanh bò non (nồng độ cuối cùng)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Donor age
68 năm
Ethnicity
Châu Âu