Tartalomra ugrás
Szövet
Tüdő
Betegség
Adenokarcinóma
Áttétes hely
Nyirokcsomó
Szinonimák
H2009, H-2009, NCIH2009

Dokumentumok

NCI-H2009

Cell line · Termékszám 305283

€0.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

Az NCI-H2009 sejtvonal emberi nem-kissejtes tüdőrákból (NSCLC), konkrétan adenokarcinómából származik. Ezt a sejtvonalat széles körben használják a tüdőrák kutatásában az adenokarcinóma, az NSCLC leggyakoribb altípusának molekuláris és sejtes mechanizmusainak tanulmányozására. Az NCI-H2009 sejtek értékesek a tüdőadenokarcinómával kapcsolatos genetikai mutációk, jelátviteli útvonalak és terápiás válaszok vizsgálatában.

Az NCI-H2009 sejtek epiteliális morfológiát mutatnak és a tüdőadenokarcinómára jellemző markereket expresszálnak, beleértve a citocheratinokat és a karcinoembrionális antigént (CEA). Az NSCLC-ben gyakran megfigyelt genetikai változásokat hordoznak, például a sejtek jelátvitelében, növekedésében és túlélésében kulcsfontosságú KRAS gén mutációit. A kutatók az NCI-H2009 sejteket használják a tüdőrák progressziójában szerepet játszó kulcsfontosságú jelátviteli útvonalak, például az EGFR, KRAS és PI3K/Akt útvonalak feltárására. Ezeket a sejteket nagy áteresztőképességű gyógyszerszűrési vizsgálatokban és kemoterápiás szerek, célzott terápiák és immunterápiák preklinikai tesztelésében is alkalmazzák. Emellett az NCI-H2009 sejteket gyógyszerrezisztencia mechanizmusainak tanulmányozására és a rezisztencia leküzdésére szolgáló stratégiák kidolgozására is használják. Az NCI-H2009 sejtvonal jelentőségét a tüdőadenokarcinóma kutatásában az emeli ki, hogy fontos szerepet játszik a tüdőrák biológiájának megértésében és új, hatékonyabb kezelési módszerek kidolgozásában a nem kissejtes tüdőrákos betegek számára.

Szövet
Tüdő
Betegség
Adenokarcinóma
Áttétes hely
Nyirokcsomó
Szinonimák
  • H2009
  • H-2009
  • NCIH2009

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelialis

04Azonosítók

Hivatkozás
NCI-H2009 (Cytion katalógusszám: 305283)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_1514

05Kifejeződés és fogékonyság

Mutációs profil
Mutáció: B2M, p.Met1Val (c.1A>G), heterozigóta; Mutáció: B2M, p.Gln28Ter (c.82C>T), heterozigóta; Mutáció: KRAS, p.Gly12Ala (c.35G>C), heterozigóta; Mutáció: TERT, c.1-124C>T (c.228C>T) (C228T); Mutáció: TP53, p.Arg273Leu (c.818G>T), homozigóta
Vírusok
Transzformáns: Epstein-Barr-vírus (EBV)

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj

HITES tápközeg kiegészítve

Ennek a sejtvonalnak az alap táptalaja a DF12. A teljes táptalaj elkészítéséhez adja hozzá a következő összetevőket az alap táptalajhoz:

  • 0,005 mg/ml inzulin
  • 0,01 mg/ml transzferrin
  • 30 nM nátrium-szelenit (végső koncentráció)
  • 10 nM hidrokortizon (végső koncentráció)
  • 10 nM béta-ösztradiol (végső koncentráció)
  • Extra 2 mM L-glutamin (4,5 mM végső koncentrációhoz)
  • 5% borjú szérum (végső koncentráció)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
68 év
Etnikai hovatartozás
Európai