Langsung ke isi
Tisu
Paru-paru
Penyakit
Adenokarsinoma
Lokasi metastasis
Kelenjar getah bening
Sinonim
H2009, H-2009, NCIH2009

NCI-H2009

Cell line · Nomor produk 305283

€0.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim
Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
  • CoA
1

01Informasi umum

Deskripsi

Baris sel NCI-H2009 berasal dari kanker paru-paru non-sel kecil (NSCLC) pada manusia, khususnya adenokarsinoma. Baris sel ini secara luas digunakan dalam penelitian kanker paru-paru untuk mempelajari mekanisme molekuler dan seluler yang mendasari adenokarsinoma, subtipe paling umum dari NSCLC. Sel NCI-H2009 berguna untuk menyelidiki mutasi genetik, jalur transduksi sinyal, dan respons terapeutik yang terkait dengan adenokarsinoma paru.

Sel NCI-H2009 menunjukkan morfologi epitel dan mengekspresikan penanda khas adenokarsinoma paru, termasuk sitokeratin dan antigen embrio kanker (CEA). Sel ini mengandung perubahan genetik yang sering ditemukan pada NSCLC, seperti mutasi pada gen KRAS, yang berperan penting dalam sinyal sel, pertumbuhan, dan kelangsungan hidup. Para peneliti menggunakan sel NCI-H2009 untuk mengeksplorasi jalur sinyal kunci yang terlibat dalam perkembangan kanker paru-paru, seperti jalur EGFR, KRAS, dan PI3K/Akt. Sel-sel ini juga digunakan dalam uji skrining obat berkapasitas tinggi dan uji praklinis agen kemoterapi, terapi target, dan imunoterapi. Selain itu, sel NCI-H2009 digunakan untuk mempelajari mekanisme resistensi obat dan mengembangkan strategi untuk mengatasinya. Relevansi garis sel NCI-H2009 dalam penelitian adenokarsinoma paru-paru menyoroti pentingnya dalam meningkatkan pemahaman kita tentang biologi kanker paru-paru dan dalam mengembangkan pendekatan pengobatan baru dan lebih efektif untuk pasien dengan NSCLC.

Tisu
Paru-paru
Penyakit
Adenokarsinoma
Lokasi metastasis
Kelenjar getah bening
Sinonim
  • H2009
  • H-2009
  • NCIH2009

02Klasifikasi

Organisme
Manusia
Seks
Perempuan
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Epitel

04Pengidentifikasi

Referensi
NCI-H2009 (Nomor katalog Cytion 305283)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1514

05Ekspresi dan kerentanan

Profil mutasi
Mutasi: B2M, p.Met1Val (c.1A>G), heterozigot; Mutasi: B2M, p.Gln28Ter (c.82C>T), heterozigot; Mutasi: KRAS, p.Gly12Ala (c.35G>C), heterozigot; Mutasi: TERT, c.1-124C>T (c.228C>T) (C228T); Mutasi: TP53, p.Arg273Leu (c.818G>T), homozigot
Virus
Transforman: Virus Epstein-Barr (EBV)

06Penanganan dan budidaya

Media kultur

HITES medium yang diperkaya

Media dasar untuk garis sel ini adalah DF12. Untuk membuat media pertumbuhan lengkap, tambahkan komponen-komponen berikut ke media dasar:

  • 0,005 mg/ml Insulin
  • 0,01 mg/ml Transferrin
  • 30 nM Natrium selenit (konsentrasi akhir)
  • 10 nM Hidrokortison (konsentrasi akhir)
  • 10 nM beta-estradiol (konsentrasi akhir)
  • Tambahan 2 mM L-glutamin (untuk konsentrasi akhir 4,5 mM)
  • 5% serum sapi janin (konsentrasi akhir)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Pergantian cairan
2 hingga 3 kali per minggu
Pencairan dan pembiakan
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Usia donor
68 tahun
Etnis
Eropa