Mine otse sisu juurde
Kude
Kopsud
Haigus
Adenokartsinoom
Metastaaside asukoht
Lümfisõlm
Sünonüümid
H2009, H-2009, NCIH2009

Dokumendid

NCI-H2009

Cell line · Toote number 305283

€0.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

NCI-H2009 rakuliin on saadud inimese mitteväikerakk-kopsuvähist (NSCLC), täpsemalt adenokartsinoomist. Seda rakuliini kasutatakse laialdaselt kopsuvähi uuringutes, et uurida adenokartsinoomi, NSCLC kõige levinuma alatüübi molekulaarseid ja rakulisi mehhanisme. NCI-H2009 rakud on väärtuslikud kopsu adenokartsinoomiga seotud geneetiliste mutatsioonide, signaaliülekande radade ja ravivastuste uurimisel.

NCI-H2009 rakud näitavad epiteelמורfoloogiat ja ekspresseerivad kopsu adenokartsinoomile iseloomulikke markereid, sealhulgas tsütokeratine ja kartsinoembrüonaalset antigeeni (CEA). Need rakud sisaldavad NSCLC-s sageli esinevaid geneetilisi muutusi, nagu mutatsioonid KRAS-geenis, mis on oluline rakkude signaalimisel, kasvul ja ellujäämisel. Teadlased kasutavad NCI-H2009 rakke, et uurida kopsuvähi progresseerumises osalevaid olulisi signaaliedastusradu, nagu EGFR, KRAS ja PI3K/Akt radad. Neid rakke kasutatakse ka suure läbilaskevõimega ravimite sõelumise testides ja kemoteraapiapreparaatide, sihtotstarbeliste ravimeetodite ja immunoteraapiate prekliinilistes katsetes. Lisaks kasutatakse NCI-H2009 rakke ravimresistentsuse mehhanismide uurimiseks ja selle ületamise strateegiate väljatöötamiseks. NCI-H2009 rakuliini olulisus kopsu adenokartsinoomi uurimisel rõhutab selle tähtsust meie arusaama edendamisel kopsuvähi bioloogiast ja uute ja tõhusamate ravimeetodite väljatöötamisel NSCLC-patsientidele.

Kude
Kopsud
Haigus
Adenokartsinoom
Metastaaside asukoht
Lümfisõlm
Sünonüümid
  • H2009
  • H-2009
  • NCIH2009

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel

04Tunnused

Viide
NCI-H2009 (Cytioni katalooginumber 305283)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1514

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Mutatsiooniprofiil
Mutatsioon: B2M, p.Met1Val (c.1A>G), heterosügootne; Mutatsioon: B2M, p.Gln28Ter (c.82C>T), heterosügootne; Mutatsioon: KRAS, p.Gly12Ala (c.35G>C), heterosügootne; Mutatsioon: TERT, c.1-124C>T (c.228C>T) (C228T); Mutatsioon: TP53, p.Arg273Leu (c.818G>T), homosügootne
Viirused
Transformant: Epstein-Barri viirus (EBV)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond

HITES-keskkonna täiendamine

Selle rakuliini baaskeskkonnaks on DF12. Täieliku kasvukeskkonna valmistamiseks lisage baaskeskkonnale järgmised komponendid:

  • 0,005 mg/ml insuliini
  • 0,01 mg/ml transferriin
  • 30 nM naatriumseleniit (lõplik kontsentratsioon)
  • 10 nM hüdrokortisoon (lõplik kontsentratsioon)
  • 10 nM beeta-östradiool (lõplik kontsentratsioon)
  • Lisaks 2 mM L-glutamiini (lõplik kontsentratsioon 4,5 mM)
  • 5% loote veise seerum (lõplik kontsentratsioon)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
68 aastat
Etniline kuuluvus
Euroopa