- Kude
- Kopsud
- Haigus
- Adenokartsinoom
- Metastaaside asukoht
- Lümfisõlm
- Sünonüümid
- H2009, H-2009, NCIH2009
Dokumendid
NCI-H2009
Cell line · Toote number 305283
Kohandamine / Soovitused
- NCI-H2009Cell line€0.00
Soovitatav (värskeim partii)
01Üldine teave
- Kirjeldus
NCI-H2009 rakuliin on saadud inimese mitteväikerakk-kopsuvähist (NSCLC), täpsemalt adenokartsinoomist. Seda rakuliini kasutatakse laialdaselt kopsuvähi uuringutes, et uurida adenokartsinoomi, NSCLC kõige levinuma alatüübi molekulaarseid ja rakulisi mehhanisme. NCI-H2009 rakud on väärtuslikud kopsu adenokartsinoomiga seotud geneetiliste mutatsioonide, signaaliülekande radade ja ravivastuste uurimisel.
NCI-H2009 rakud näitavad epiteelמורfoloogiat ja ekspresseerivad kopsu adenokartsinoomile iseloomulikke markereid, sealhulgas tsütokeratine ja kartsinoembrüonaalset antigeeni (CEA). Need rakud sisaldavad NSCLC-s sageli esinevaid geneetilisi muutusi, nagu mutatsioonid KRAS-geenis, mis on oluline rakkude signaalimisel, kasvul ja ellujäämisel. Teadlased kasutavad NCI-H2009 rakke, et uurida kopsuvähi progresseerumises osalevaid olulisi signaaliedastusradu, nagu EGFR, KRAS ja PI3K/Akt radad. Neid rakke kasutatakse ka suure läbilaskevõimega ravimite sõelumise testides ja kemoteraapiapreparaatide, sihtotstarbeliste ravimeetodite ja immunoteraapiate prekliinilistes katsetes. Lisaks kasutatakse NCI-H2009 rakke ravimresistentsuse mehhanismide uurimiseks ja selle ületamise strateegiate väljatöötamiseks. NCI-H2009 rakuliini olulisus kopsu adenokartsinoomi uurimisel rõhutab selle tähtsust meie arusaama edendamisel kopsuvähi bioloogiast ja uute ja tõhusamate ravimeetodite väljatöötamisel NSCLC-patsientidele.
- Kude
- Kopsud
- Haigus
- Adenokartsinoom
- Metastaaside asukoht
- Lümfisõlm
- Sünonüümid
- H2009
- H-2009
- NCIH2009
02Klassifikatsioon
- Organism
- Inimene
- Sugu
- Naine
- Kasvuvõime
- Järgija
- Bioloogilise ohutuse tase
- 1
03Omadused
- Morfoloogia
- Epiteel
04Tunnused
- Viide
- NCI-H2009 (Cytioni katalooginumber 305283)
- NCBI maksukood
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1514
05Avaldumine ja vastuvõtlikkus
- Mutatsiooniprofiil
- Mutatsioon: B2M, p.Met1Val (c.1A>G), heterosügootne; Mutatsioon: B2M, p.Gln28Ter (c.82C>T), heterosügootne; Mutatsioon: KRAS, p.Gly12Ala (c.35G>C), heterosügootne; Mutatsioon: TERT, c.1-124C>T (c.228C>T) (C228T); Mutatsioon: TP53, p.Arg273Leu (c.818G>T), homosügootne
- Viirused
- Transformant: Epstein-Barri viirus (EBV)
06Käsitlemine ja kasvatamine
- Kasvatuskeskkond
HITES-keskkonna täiendamine
Selle rakuliini baaskeskkonnaks on DF12. Täieliku kasvukeskkonna valmistamiseks lisage baaskeskkonnale järgmised komponendid:
- 0,005 mg/ml insuliini
- 0,01 mg/ml transferriin
- 30 nM naatriumseleniit (lõplik kontsentratsioon)
- 10 nM hüdrokortisoon (lõplik kontsentratsioon)
- 10 nM beeta-östradiool (lõplik kontsentratsioon)
- Lisaks 2 mM L-glutamiini (lõplik kontsentratsioon 4,5 mM)
- 5% loote veise seerum (lõplik kontsentratsioon)
- Inkubatsiooni keskkond
37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.
- Dissotsiatsioonireaktiiv
- Accutase
- Kultuuri edasikasvatamine
- Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
- Vedeliku vahetus
- 2 kuni 3 korda nädalas
- Sulatamine ja kasvatamine
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine
- Viljatus
Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.
Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.
- Külmutuskeskkond
- Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
- Säilitamistingimused
Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.
- Tarne- ja kohaletoimetamistingimused
Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
08Annetaja
- Doonori vanus
- 68 aastat
- Etniline kuuluvus
- Euroopa
09Õiguslikud ja ohutusalased küsimused
- Ohutusnõuded
- Kui plaanitakse krüoviaalide säilitamist vedelas lämmastikus tulevase sulatamise eesmärgil, on kohustuslik järgida rangeid ohutusmeetmeid. Asjakohased kaitsekindad ja -riietus on hädavajalikud ning külmutatud proovide vedela lämmastiku mahutisse või mahutist väljaviimisel tuleb kasutada näomaski või kaitseprille. See on vajalik selleks, et vähendada vigastuste ohtu, mis tuleneb võimalikest krüoviaalide plahvatustest eemaldamisel, mille tagajärjel võivad välja paiskuda teravad killud.
- Garantii
Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele
Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest
- Vajalik on materjalide üleandmise leping
- Jah


.jpg)


.jpg)

.jpg)

