Skip to content
Tissue
ปอด
Disease
อะดีโนคาร์ซิโนมา
Metastatic site
ต่อมน้ำเหลือง
Synonyms
H2009, H-2009, NCIH2009

Documents

NCI-H2009

Cell line · Product number 305283

€0.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

สายเซลล์ NCI-H2009 มีต้นกำเนิดจากมะเร็งปอดชนิดไม่ใช่เซลล์เล็ก (NSCLC) ในมนุษย์ โดยเฉพาะชนิดอะดีโนคาร์ซิโนมา สายเซลล์นี้ถูกนำมาใช้อย่างกว้างขวางในงานวิจัยเกี่ยวกับมะเร็งปอด เพื่อศึกษาวิถีทางโมเลกุลและกลไกในระดับเซลล์ที่เป็นพื้นฐานของอะดีโนคาร์ซิโนมา ซึ่งเป็นชนิดย่อยที่พบได้บ่อยที่สุดของ NSCLC เซลล์ NCI-H2009 มีคุณค่าในการศึกษาการกลายพันธุ์ทางพันธุกรรม, เส้นทางการส่งสัญญาณ, และการตอบสนองต่อการรักษาที่เกี่ยวข้องกับมะเร็งปอดชนิดอะดีโนคาร์ซิโนมา

เซลล์ NCI-H2009 แสดงลักษณะทางสัณฐานวิทยาของเซลล์เยื่อบุผิวและแสดงเครื่องหมายเฉพาะของมะเร็งปอดชนิดอะดีโนคาร์ซิโนมา รวมถึงไซโตเคราตินและแอนติเจนคาร์ซิโนเอ็มบริโอนิก (CEA) เซลล์เหล่านี้มีการเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรมที่พบได้บ่อยในมะเร็งปอดชนิดไม่เซลล์เล็ก (NSCLC) เช่น การกลายพันธุ์ในยีน KRAS ซึ่งมีบทบาทสำคัญในกระบวนการส่งสัญญาณของเซลล์ การเจริญเติบโต และการอยู่รอดของเซลล์ นักวิจัยใช้เซลล์ NCI-H2009 เพื่อสำรวจเส้นทางการส่งสัญญาณสำคัญที่เกี่ยวข้องกับการลุกลามของมะเร็งปอด เช่น เส้นทาง EGFR, KRAS และ PI3K/Akt เซลล์เหล่านี้ยังถูกนำมาใช้ในการทดสอบการคัดกรองยาแบบความจุสูงและการทดสอบก่อนการทดลองในสัตว์ของยาเคมีบำบัด การบำบัดแบบมุ่งเป้า และการบำบัดด้วยภูมิคุ้มกัน นอกจากนี้ เซลล์ NCI-H2009 ยังถูกใช้ในการศึกษาวิธีการดื้อยาและพัฒนากลยุทธ์เพื่อเอาชนะการดื้อยา ความเกี่ยวข้องของเซลล์ไลน์ NCI-H2009 ในการวิจัยมะเร็งปอดชนิดอะดีโนคาร์ซิโนมาเน้นย้ำถึงความสำคัญในการพัฒนาความเข้าใจเกี่ยวกับชีววิทยาของมะเร็งปอดและการพัฒนาแนวทางการรักษาใหม่ที่มีประสิทธิภาพมากขึ้นสำหรับผู้ป่วยที่เป็นมะเร็งปอดชนิดไม่เซลล์เล็ก (NSCLC)

Tissue
ปอด
Disease
อะดีโนคาร์ซิโนมา
Metastatic site
ต่อมน้ำเหลือง
Synonyms
  • H2009
  • H-2009
  • NCIH2009

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
เยื่อบุผิว

04Identifiers

Citation
NCI-H2009 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305283)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1514

05Expression and susceptibility

Mutational profile
การกลายพันธุ์: B2M, p.Met1Val (c.1A>G), ชนิดเฮเทอโรไซโกต; การกลายพันธุ์: B2M, p.Gln28Ter (c.82C>T), ชนิดเฮเทอโรไซโกต; การกลายพันธุ์: KRAS, p.Gly12Ala (c.35G>C), ชนิดเฮเทอโรไซโกต; การกลายพันธุ์: TERT, c.1-124C>T (c.228C>T) (C228T); การกลายพันธุ์: TP53, p.Arg273Leu (c.818G>T), ชนิดโฮโมไซโกต
Viruses
ทรานส์ฟอร์แมนท์: ไวรัสเอปสไตน์-บาร์ร์ (EBV)

06Handling and culture

Culture medium

อาหารเสริม HITES ระดับกลาง

อาหารพื้นฐานสำหรับเซลล์ไลน์นี้คือ DF12 ในการเตรียมอาหารเลี้ยงเซลล์แบบสมบูรณ์ ให้เติมส่วนประกอบต่อไปนี้ลงในอาหารพื้นฐาน:

  • 0.005 มิลลิกรัม/มิลลิลิตร อินซูลิน
  • 0.01 มก./มล. ทรานส์เฟอร์ริน
  • 30 นาโนโมล Sodium selenite (ความเข้มข้นสุดท้าย)
  • ไฮโดรคอร์ติโซน 10 นาโนโมลาร์ (ความเข้มข้นสุดท้าย)
  • 10 นาโนโมลาร์ เบต้า-เอสตราไดออล (ความเข้มข้นสุดท้าย)
  • กรดกลูตามีน (L-glutamine) เพิ่มเติม 2 มิลลิโมลาร์ (เพื่อให้ได้ความเข้มข้นสุดท้าย 4.5 มิลลิโมลาร์)
  • 5% เซรั่มจากตัวอ่อนวัว (ความเข้มข้นสุดท้าย)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
68 ปี
Ethnicity
ยุโรป