Gå direkt till innehållet
Vävnad
Lungan
Sjukdom
Adenocarcinom
Metastaseringsställe
Lymfkörtel
Synonymer
H2009, H-2009, NCIH2009

NCI-H2009

Cell line · Produktnummer 305283

€0.00exkl. moms och frakt
Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

Cellinjen NCI-H2009 härrör från ett humant icke-småcelligt lungkarcinom (NSCLC), närmare bestämt ett adenokarcinom. Denna cellinje används flitigt inom lungcancerforskningen för att studera de molekylära och cellulära mekanismer som ligger bakom adenokarcinom, den vanligaste subtypen av NSCLC. NCI-H2009-celler är värdefulla för att undersöka genetiska mutationer, signaltransduktionsvägar och terapeutiska svar som är associerade med lungadenokarcinom.

NCI-H2009-cellerna uppvisar en epitelial morfologi och uttrycker markörer som är karakteristiska för lungadenokarcinom, inklusive cytokeratiner och carcinoembryonalt antigen (CEA). De har genetiska förändringar som ofta observeras i NSCLC, till exempel mutationer i KRAS-genen, som är central för cellsignalering, tillväxt och överlevnad. Forskare använder NCI-H2009-celler för att utforska viktiga signalvägar som är involverade i utvecklingen av lungcancer, till exempel EGFR-, KRAS- och PI3K/Akt-signalvägarna. Dessa celler används också i högkapacitetsanalyser för läkemedelsscreening och preklinisk testning av kemoterapeutiska medel, riktade terapier och immunterapier. Dessutom används NCI-H2009-celler för att studera mekanismer för läkemedelsresistens och för att utveckla strategier för att övervinna den. Relevansen av cellinjen NCI-H2009 inom forskningen om lungadenocarcinom understryker dess betydelse för att öka vår förståelse av lungcancerns biologi och för att utveckla nya och effektivare behandlingsmetoder för patienter med NSCLC.

Vävnad
Lungan
Sjukdom
Adenocarcinom
Metastaseringsställe
Lymfkörtel
Synonymer
  • H2009
  • H-2009
  • NCIH2009

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Kvinna
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelial

04Identifierare

Källa
NCI-H2009 (Cytion katalognummer 305283)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1514

05Uttryck och mottaglighet

Mutationsprofil
Mutation: B2M, p.Met1Val (c.1A>G), heterozygot; Mutation: B2M, p.Gln28Ter (c.82C>T), heterozygot; Mutation: KRAS, p.Gly12Ala (c.35G>C), heterozygot; Mutation: TERT, c.1-124C>T (c.228C>T) (C228T); Mutation: TP53, p.Arg273Leu (c.818G>T), homozygot
Virus
Transformant: Epstein-Barr-virus (EBV)

06Hantering och odling

Odlingsmedium

HITES-medium kompletterat

Basmediet för denna cellinje är DF12. För att framställa det kompletta odlingsmediet, tillsätt följande komponenter till basmediet:

  • 0,005 mg/ml insulin
  • 0,01 mg/ml transferrin
  • 30 nM natriumselenit (slutkoncentration)
  • 10 nM hydrokortison (slutkoncentration)
  • 10 nM beta-östradiol (slutkoncentration)
  • Extra 2 mM L-glutamin (för slutkoncentration på 4,5 mM)
  • 5 % fetalt bovint serum (slutkoncentration)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Donatorns ålder
68 år
Etnicitet
Europeiska