Μετάβαση στο περιεχόμενο
Ιστός
Πνεύμονας
Ασθένεια
Αδενοκαρκίνωμα
Θέση μετάστασης
Λεμφαδένας
Συνώνυμα
H2009, H-2009, NCIH2009

Έγγραφα

NCI-H2009

Cell line · Αριθμός προϊόντος 305283

€0.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής
Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η κυτταρική σειρά NCI-H2009 προέρχεται από ανθρώπινο μη μικροκυτταρικό καρκίνωμα του πνεύμονα (NSCLC), συγκεκριμένα από αδενοκαρκίνωμα. Αυτή η κυτταρική σειρά χρησιμοποιείται εκτενώς στην έρευνα για τον καρκίνο του πνεύμονα για τη μελέτη των μοριακών και κυτταρικών μηχανισμών που υποκρύπτονται στο αδενοκαρκίνωμα, τον πιο κοινό υποτύπο του NSCLC. Τα κύτταρα NCI-H2009 είναι πολύτιμα για τη διερεύνηση γενετικών μεταλλάξεων, οδών μεταγωγής σήματος και θεραπευτικών αποκρίσεων που σχετίζονται με το αδενοκαρκίνωμα του πνεύμονα.

Τα κύτταρα NCI-H2009 εμφανίζουν επιθηλιακή μορφολογία και εκφράζουν δείκτες χαρακτηριστικούς του αδενοκαρκινώματος του πνεύμονα, συμπεριλαμβανομένων των κυτοκερατινών και του καρκινοεμβρυϊκού αντιγόνου (CEA). Φέρουν γενετικές αλλοιώσεις που παρατηρούνται συχνά στο NSCLC, όπως μεταλλάξεις στο γονίδιο KRAS, το οποίο είναι ζωτικής σημασίας για την κυτταρική σηματοδότηση, την ανάπτυξη και την επιβίωση. Οι ερευνητές χρησιμοποιούν τα κύτταρα NCI-H2009 για να διερευνήσουν βασικές οδούς σηματοδότησης που εμπλέκονται στην εξέλιξη του καρκίνου του πνεύμονα, όπως οι οδοί EGFR, KRAS και PI3K/Akt. Αυτά τα κύτταρα χρησιμοποιούνται επίσης σε δοκιμές υψηλής απόδοσης για τον έλεγχο φαρμάκων και σε προκλινικές δοκιμές χημειοθεραπευτικών παραγόντων, στοχευμένων θεραπειών και ανοσοθεραπειών. Επιπλέον, τα κύτταρα NCI-H2009 χρησιμοποιούνται για τη μελέτη των μηχανισμών αντοχής στα φάρμακα και για την ανάπτυξη στρατηγικών για την υπέρβασή τους. Η σημασία της κυτταρικής σειράς NCI-H2009 στην έρευνα για το αδενοκαρκίνωμα του πνεύμονα υπογραμμίζει τη σημασία της στην προώθηση της κατανόησης της βιολογίας του καρκίνου του πνεύμονα και στην ανάπτυξη νέων και πιο αποτελεσματικών θεραπευτικών προσεγγίσεων για ασθενείς με NSCLC.

Ιστός
Πνεύμονας
Ασθένεια
Αδενοκαρκίνωμα
Θέση μετάστασης
Λεμφαδένας
Συνώνυμα
  • H2009
  • H-2009
  • NCIH2009

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Γυναίκα
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιακό

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
NCI-H2009 (αριθμός καταλόγου Cytion 305283)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_1514

05Έκφραση και ευαισθησία

Προφίλ μεταλλάξεων
Μετάλλαξη: B2M, p.Met1Val (c.1A>G), ετερόζυγη; Μετάλλαξη: B2M, p.Gln28Ter (c.82C>T), ετερόζυγη; Μετάλλαξη: KRAS, p.Gly12Ala (c.35G>C), ετερόζυγη; Μετάλλαξη: TERT, c.1-124C>T (c.228C>T) (C228T) · Μετάλλαξη: TP53, p.Arg273Leu (c.818G>T), ομόζυγο
Ιοί
Μετασχηματιστής: (EBV)

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο

Συμπληρωμένο μέσο HITES

Το βασικό μέσο για αυτή την κυτταρική σειρά είναι το DF12. Για να παρασκευάσετε το πλήρες μέσο ανάπτυξης, προσθέστε τα ακόλουθα συστατικά στο βασικό μέσο:

  • 0,005 mg/ml ινσουλίνη
  • 0,01 mg/ml τρανσφερίνη
  • 30 nM Σεληνικό νάτριο (τελική συγκέντρωση)
  • 10 nM υδροκορτιζόνη (τελική συγκέντρωση)
  • 10 nM β-οιστραδιόλη (τελική συγκέντρωση)
  • Επιπλέον 2 mM L-γλουταμίνη (για τελική συγκέντρωση 4,5 mM)
  • 5% εμβρυϊκό βόειο ορό (τελική συγκέντρωση)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Ηλικία δωρητή
68 χρόνια
Εθνικότητα
Ευρωπαϊκό

Ίσως χρειαστείτε επίσης