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Tissue
Pulmón
Disease
Adenocarcinoma
Metastatic site
Ganglio linfático
Synonyms
H2009, H-2009, NCIH2009

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NCI-H2009

Cell line · Product number 305283

US$550.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

La línea celular NCI-H2009 se deriva de un carcinoma pulmonar de células no pequeñas (NSCLC) humano, específicamente un adenocarcinoma. Esta línea celular se utiliza ampliamente en la investigación del cáncer de pulmón para estudiar los mecanismos moleculares y celulares subyacentes al adenocarcinoma, el subtipo más común de NSCLC. Las células NCI-H2009 son valiosas para investigar mutaciones genéticas, vías de transducción de señales y respuestas terapéuticas asociadas con el adenocarcinoma de pulmón.

Las células NCI-H2009 presentan una morfología epitelial y expresan marcadores característicos del adenocarcinoma de pulmón, entre ellos las citoqueratinas y el antígeno carcinoembrionario (CEA). Presentan alteraciones genéticas que se observan con frecuencia en el NSCLC, como mutaciones en el gen KRAS, que es fundamental para la señalización, el crecimiento y la supervivencia celular. Los investigadores utilizan las células NCI-H2009 para explorar las vías de señalización clave involucradas en la progresión del cáncer de pulmón, como las vías del EGFR, KRAS y PI3K/Akt. Estas células también se emplean en ensayos de cribado de fármacos de alto rendimiento y en pruebas preclínicas de agentes quimioterapéuticos, terapias dirigidas e inmunoterapias. Además, las células NCI-H2009 se utilizan para estudiar los mecanismos de resistencia a los medicamentos y para desarrollar estrategias que permitan superarla. La relevancia de la línea celular NCI-H2009 en la investigación del adenocarcinoma de pulmón resalta su importancia para avanzar en nuestra comprensión de la biología del cáncer de pulmón y para desarrollar enfoques terapéuticos nuevos y más eficaces para los pacientes con CPNM.

Tissue
Pulmón
Disease
Adenocarcinoma
Metastatic site
Ganglio linfático
Synonyms
  • H2009
  • H-2009
  • NCIH2009

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Epithelial

04Identifiers

Citation
NCI-H2009 (número de catálogo de Cytion 305283)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1514

05Expression and susceptibility

Mutational profile
Mutación: B2M, p.Met1Val (c.1A>G), heterocigótica; Mutación: B2M, p.Gln28Ter (c.82C>T), heterocigótica; Mutación: KRAS, p.Gly12Ala (c.35G>C), heterocigótica; Mutación: TERT, c.1-124C>T (c.228C>T) (C228T); Mutación: TP53, p.Arg273Leu (c.818G>T), homocigoto
Viruses
Transformante: virus de Epstein-Barr (VEB)

06Handling and culture

Culture medium

Medio HITES suplementado

El medio base para esta línea celular es el DF12. Para preparar el medio de crecimiento completo, agrega los siguientes componentes al medio base:

  • 0,005 mg/ml de insulina
  • 0,01 mg/ml de transferrina
  • 30 nM de selenito de sodio (concentración final)
  • 10 nM de hidrocortisona (concentración final)
  • 10 nM de beta-estradiol (concentración final)
  • 2 mM adicionales de L-glutamina (para una concentración final de 4,5 mM)
  • 5 % de suero fetal bovino (concentración final)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco.
Fluid renewal
De 2 a 3 veces por semana
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Freeze medium
Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
Storage conditions

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Shipping conditions

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

08Donor

Donor age
68 años
Ethnicity
Europeo