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B-LCL-HROG02
Tissu
Sang périphérique
Maladie
Lignée cellulaire lymphoblastoïde B transformée par l'EBV (B-LCL) ; donneur atteint d'un cancer gastrique

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B-LCL-HROG02

Cell line · Référence du produit 302106

B-LCL-HROG02 is a human Epstein-Barr virus (EBV)-transformed B lymphoblastoid cell line (B-LCL) established from the peripheral blood of a 68-year-old Cau...

€777.00hors taxes et frais de port

Personnalisation / Recommandations

Fabriqué sur commande
1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire B-LCL-HROG02 est une lignée de cellules lymphoblastoïdes B humaines transformées par le virus d'Epstein-Barr (EBV) (B-LCL) établie à partir du sang périphérique d’un patient caucasien de 68 ans atteint d’un cancer gastrique, issu de la série de la biobanque HROG, qui correspond à la collection HROC de B-LCL issues de cancers colorectaux. L’immortalisation in vitro des lymphocytes B primaires du sang périphérique, induite par l’EBV, a permis d’obtenir une lignée cellulaire en suspension à prolifération stable, présentant une morphologie de type lymphoblaste. Les cellules HROG02 expriment de manière constitutive les antigènes de latence de l’EBV (EBNA-1, -2, -3, LMP-1, -2) ainsi que des taux élevés de molécules HLA de classe I et II, de molécules co-stimulatrices CD80 et CD86, de molécules d’adhésion CD54 et CD58, et de marqueurs des lymphocytes B CD19, CD20 et CD23.

La lignée B-LCL-HROG02 est utilisée dans les tests fonctionnels des lymphocytes T et des cellules NK, le typage HLA, les réactions lymphocytaires mixtes, les études sur la présentation des antigènes et les protocoles d’induction des lymphocytes T cytotoxiques (CTL). Au sein de la biobanque HROG appariée aux patients, elle constitue une référence immunologique définie pour la recherche sur le cancer gastrique, permettant des études autologues ou allogéniques des réponses immunitaires associées à la tumeur. Cette lignée soutient les recherches sur la réactivité des lymphocytes T spécifiques au cancer gastrique et les systèmes de tests immunologiques appariés aux patients, pertinents pour l’immunologie des tumeurs gastriques.

Tissu
Sang périphérique
Maladie
Lignée cellulaire lymphoblastoïde B transformée par l'EBV (B-LCL) ; donneur atteint d'un cancer gastrique
Applications
Recherche en immunologie ; dosages des lymphocytes T et des cellules NK ; typage HLA ; études sur la présentation des antigènes ; réactions lymphocytaires mixtes ; cellules cibles pour les dosages des lymphocytes T cytotoxiques (CTL) ; immunologie du cancer gastrique

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Homme
Propriétés de croissance
Suspension
Statut OGM
GMO-S2
Informations détaillées sur le statut OGM
GMO-S2: This B-LCL contains a stably maintained EBV episome encoding viral latent-phase genes (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV is classified as a risk group 2 pathogen. Handling requires BSL-2 containment. This classification applies within Germany; regulations may differ in other jurisdictions.
Niveau de biosécurité
2

03Caractéristiques

Morphologie
De type lymphoblaste
Type de cellule
B lymphoblaste
Temps de doublement
24 à 48 heures

04Identifiants

Référence
B-LCL-HROG02 (référence Cytion 302106)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606

05Expression et sensibilité

Virus
Transformant : EBV

06Manipulation et culture

Milieu de culture
RPMI 1640, w : 2.0 mM Glutamine stable, w : 2.0 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820700a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Ajouter 15 à 20 % de FBS au milieu de culture
Repiquage
Diluez la culture à une concentration de 2 à 5 × 10⁵ cellules/ml avec du milieu complet frais et préchauffé tous les 2 à 3 jours. Comptez les cellules viables avant le repiquage afin de maintenir une densité optimale. Ne laissez pas les cultures dépasser 2 × 10⁶ cellules/ml. Une centrifugation (300 × g, 5 min) peut être effectuée pour renouveler le milieu si nécessaire. Aucune dissociation enzymatique n’est requise.
Rapport de fractionnement
1 à 4
Densité de semis
2 à 5 × 10⁵ cellules/ml
Renouvellement des fluides
Tous les 2 ou 3 jours
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Contrôle qualité et cryoconservation

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
68 ans
Origine ethnique
Caucasien