Přejít na obsah
B-LCL-HROG02
Tkáň
Periferní krev
Nemoc
B-lymfoblastoidní buněčná linie transformovaná virem EBV (B-LCL); dárce s rakovinou žaludku

Dokumenty

B-LCL-HROG02

Cell line · Číslo výrobku 302106

B-LCL-HROG02 is a human Epstein-Barr virus (EBV)-transformed B lymphoblastoid cell line (B-LCL) established from the peripheral blood of a 68-year-old Cau...

€777.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Na zakázku
1

01Obecné informace

Popis

B-LCL-HROG02 je lidská B-lymfoblastoidní buněčná linie transformovaná virem Epstein-Barr (EBV) (B-LCL), získaná z periferní krve 68letého muže kavkazského původu s rakovinou žaludku v rámci série biobanky HROG, která představuje protějšek kolekce B-LCL pro kolorektální karcinom HROC v případě rakoviny žaludku. EBV-zprostředkovaná in vitro imortalizace primárních B-lymfocytů z periferní krve vedla k vytvoření stabilně se množící suspenzní buněčné linie s morfologií podobnou lymfoblastům. Buňky HROG02 konstitutivně exprimují antigeny EBV v latentním stavu (EBNA-1, -2, -3, LMP-1, -2) a vysoké hladiny molekul HLA třídy I a II, kostimulačních molekul CD80 a CD86, adhezních molekul CD54 a CD58 a markerů B buněk CD19, CD20 a CD23.

B-LCL-HROG02 se používá ve funkčních testech T-buněk a NK-buněk, při typizaci HLA, ve smíšených lymfocytárních reakcích, ve studiích prezentace antigenů a v protokolech indukce CTL. V rámci biobanky HROG, jejíž vzorky jsou shody s konkrétními pacienty, poskytuje definovanou imunologickou referenci pro výzkum rakoviny žaludku a umožňuje autologní nebo alogenní studie imunitních reakcí spojených s nádorem. Tato linie podporuje výzkum reaktivity T buněk specifické pro rakovinu žaludku a imunitní testovací systémy shody s pacienty relevantní pro imunologii nádorů žaludku.

Tkáň
Periferní krev
Nemoc
B-lymfoblastoidní buněčná linie transformovaná virem EBV (B-LCL); dárce s rakovinou žaludku
Aplikace
Imunologický výzkum; testy T-buněk a NK-buněk; typizace HLA; studie prezentace antigenů; reakce smíšených lymfocytů; cílové buňky pro testy CTL; imunologie rakoviny žaludku

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Odpružení
Stav GMO
GMO-S2
Podrobnosti o statusu GMO
GMO-S2: This B-LCL contains a stably maintained EBV episome encoding viral latent-phase genes (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV is classified as a risk group 2 pathogen. Handling requires BSL-2 containment. This classification applies within Germany; regulations may differ in other jurisdictions.
Úroveň biologické bezpečnosti
2

03Charakteristika

Morfologie
Lymfoblastům podobné
Typ buňky
B lymfoblast
Doba zdvojnásobení
24 až 48 hodin

04Identifikátory

Citace
B-LCL-HROG02 (katalogové číslo Cytion 302106)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606

05Exprese a náchylnost

Viry
Transformant: EBV

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium 15–20 % FBS
Subkultivace
Každé 2–3 dny zřeďte kulturu na 2–5 × 10⁵ buněk/ml čerstvým, předem ohřátým kompletním médiem. Před pasážováním spočítejte životaschopné buňky, abyste udrželi optimální hustotu. Nenechte hustotu kultur překročit hodnotu 2 × 10⁶ buněk/ml. V případě potřeby lze k výměně média použít odstředění (300 × g, 5 min). Enzymatická disociace není nutná.
Poměr rozdělení
1 až 4
Hustota výsevu
2 až 5 × 10⁵ buněk/ml
Obnova tekutin
Každé 2 až 3 dny
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium + 10% DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
68 let
Etnická příslušnost
Kavkazský