Pereiti prie turinio
B-LCL-HROG02
Audinys
Periferinis kraujas
Liga
EBV transformuota B limfoblastoidinė ląstelių linija (B-LCL); su skrandžio vėžiu susijęs donoras

Dokumentai

B-LCL-HROG02

Cell line · Prekės numeris 302106

B-LCL-HROG02 is a human Epstein-Barr virus (EBV)-transformed B lymphoblastoid cell line (B-LCL) established from the peripheral blood of a 68-year-old Cau...

€777.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Pagaminta pagal užsakymą
1

01Bendra informacija

Aprašymas

B-LCL-HROG02 yra žmogaus Epštejno-Barro viruso (EBV) transformuota B limfoblastoidinė ląstelių linija (B-LCL), sukurta iš 68 metų amžiaus kaukazietiškos kilmės vyro, sergančio skrandžio vėžiu, periferinio kraujo, priklausančio HROG biobanko serijai, kuri yra HROC storosios žarnos vėžio B-LCL kolekcijos atitikmuo skrandžio vėžiui. EBV sukeltas pirminių periferinio kraujo B limfocitų nemirtingumas in vitro leido gauti stabiliai besidauginančią suspensijos ląstelių liniją, turinčią limfoblastams būdingą morfologiją. HROG02 ląstelės nuolat ekspresuoja EBV latentinės fazės antigenus (EBNA-1, -2, -3, LMP-1, -2) bei didelį kiekį HLA I ir II klasės molekulių, kostimuliacinių molekulių CD80 ir CD86, adhezijos molekulių CD54 ir CD58 bei B ląstelių žymenų CD19, CD20 ir CD23.

B-LCL-HROG02 naudojama T ląstelių ir NK ląstelių funkciniams tyrimams, HLA tipavimui, mišrioms limfocitų reakcijoms, antigenų pateikimo tyrimams ir CTL indukcijos protokolams. HROG pacientams pritaikytame biobanke ši linija suteikia aiškų imunologinį etaloną skrandžio vėžio tyrimams, leidžiant atlikti autologinius arba alogeninius su naviku susijusių imuninių reakcijų tyrimus. Ši linija padeda tirti skrandžio vėžiui būdingą T ląstelių reaktyvumą ir pacientams pritaikytas imunologinių tyrimų sistemas, susijusias su skrandžio naviko imunologija.

Audinys
Periferinis kraujas
Liga
EBV transformuota B limfoblastoidinė ląstelių linija (B-LCL); su skrandžio vėžiu susijęs donoras
Paraiškos
Imunologiniai tyrimai; T ląstelių ir NK ląstelių tyrimai; HLA tipavimas; antigenų pateikimo tyrimai; mišrios limfocitų reakcijos; CTL tyrimo taikinio ląstelės; skrandžio vėžio imunologija

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Pakaba
GMO statusas
GMO-S2
Išsami informacija apie GMO statusą
GMO-S2: This B-LCL contains a stably maintained EBV episome encoding viral latent-phase genes (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV is classified as a risk group 2 pathogen. Handling requires BSL-2 containment. This classification applies within Germany; regulations may differ in other jurisdictions.
Biologinio saugumo lygis
2

03Charakteristikos

Morfologija
Į limfoblastus panašus
Ląstelių tipas
B limfoblastas
Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
24-48 valandos

04Identifikatoriai

Nuoroda
B-LCL-HROG02 (Cytion katalogo numeris 302106)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606

05Išraiška ir jautrumas

Virusai
Transformantas: EBV

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
RPMI 1640, š: 2,0 mM stabilus glutaminas, š: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Į terpę įpilkite 15–20 % FBS
Subkultūrinis auginimas
Kas 2–3 dienas kultūrą praskieskite šviežia, iš anksto pašildyta pilna terpe iki 2–5 × 10⁵ ląstelių/ml. Prieš perkeliant į kitą indą, suskaičiuokite gyvybingas ląsteles, kad išlaikytumėte optimalų tankį. Neleiskite, kad kultūrų tankis viršytų 2 × 10⁶ ląstelių/ml. Prireikus terpę galima pakeisti centrifuguojant (300 × g, 5 min.). Fermentinis atskyrimas nereikalingas.
Skaidymo santykis
1–4
Sėjos tankis
nuo 2 iki 5 × 10⁵ ląstelių/ml
Skysčių atnaujinimas
Kas 2-3 dienas
Atšildymas ir auginimas

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
68 metai
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių