Gå direkte til indholdet
B-LCL-HROG02
Væv
Perifert blod
Sygdom
EBV-transformeret B-lymfoblastoidcellelinje (B-LCL); donor med mavekræft

Dokumenter

B-LCL-HROG02

Cell line · Varenummer 302106

B-LCL-HROG02 is a human Epstein-Barr virus (EBV)-transformed B lymphoblastoid cell line (B-LCL) established from the peripheral blood of a 68-year-old Cau...

€777.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

Fremstillet på bestilling
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

B-LCL-HROG02 er en human B-lymfoblastoidcellelinje, der er transformeret af Epstein-Barr-virus (EBV) (B-LCL), der er etableret ud fra perifert blod fra en 68-årig kaukasisk mandlig mavekræftpatient inden for HROG-biobankserien, som er mavekræft-modstykket til HROC-kolorektal kræft-B-LCL-samlingen. EBV-medieret in vitro-immortalisering af primære B-lymfocytter fra perifert blod resulterede i en stabilt prolifererende suspensionscellelinje med lymfoblastlignende morfologi. HROG02-celler udtrykker konstant EBV-latensantigener (EBNA-1, -2, -3, LMP-1, -2) samt høje niveauer af HLA-klasse I- og II-molekyler, kostimulerende molekyler CD80 og CD86, adhæsionsmolekyler CD54 og CD58 samt B-cellemarkører CD19, CD20 og CD23.

B-LCL-HROG02 anvendes i funktionelle analyser af T-celler og NK-celler, HLA-typebestemmelse, blandede lymfocytreaktioner, undersøgelser af antigenpræsentation samt CTL-induktionsprotokoller. Inden for den patientmatchede HROG-biobank udgør den en defineret immunologisk reference for forskning i mavekræft, hvilket muliggør autologe eller allogene undersøgelser af tumorassocierede immunresponser. Linjen understøtter undersøgelser af mavekræftspecifik T-celle-reaktivitet og patientmatchede immunanalysesystemer, der er relevante for mavetumorimmunologi.

Væv
Perifert blod
Sygdom
EBV-transformeret B-lymfoblastoidcellelinje (B-LCL); donor med mavekræft
Anvendelser
Immunologisk forskning; T-celle- og NK-celleanalyser; HLA-typebestemmelse; undersøgelser af antigenpræsentation; blandede lymfocytreaktioner; målceller til CTL-analyse; immunologi ved mavekræft

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Affjedring
GMO-status
GMO-S2
Oplysninger om GMO-status
GMO-S2: This B-LCL contains a stably maintained EBV episome encoding viral latent-phase genes (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV is classified as a risk group 2 pathogen. Handling requires BSL-2 containment. This classification applies within Germany; regulations may differ in other jurisdictions.
Biosikkerhedsniveau
2

03Egenskaber

Morfologi
Lymfoblast-lignende
Celletype
B-lymfoblast
Fordoblingstid
24 til 48 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
B-LCL-HROG02 (Cytion-katalognummer 302106)
NCBI-skattenummer
9606

05Udtryk og modtagelighed

Vira
Transformant: EBV

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Tilsæt 15–20 % FBS til mediet
Oddyrkning
Fortynd kulturen til 2–5 × 10⁵ celler/ml med frisk, forvarmet komplet medium hver 2.–3. dag. Tæl de levedygtige celler inden passagering for at opretholde en optimal tæthed. Lad ikke kulturerne overstige 2 × 10⁶ celler/ml. Centrifugering (300 × g, 5 min) kan anvendes til at udskifte mediet, når det er nødvendigt. Der kræves ingen enzymatisk dissociation.
Opdelingsforhold
1 til 4
Såtæthed
2 til 5 × 10⁵ celler/ml
Væskeudskiftning
Hver 2. til 3. dag
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium + 10 % DMSO for at opnå tilstrækkelig levedygtighed efter optøning.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
68 år
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk