İçeriğe atla
B-LCL-HROG02
Doku
Periferik kan
Hastalık
EBV ile transformlanmış B lenfoblastoid hücre hattı (B-LCL); mide kanseriyle ilişkili donör

Belgeler

B-LCL-HROG02

Cell line · Ürün numarası 302106

B-LCL-HROG02 is a human Epstein-Barr virus (EBV)-transformed B lymphoblastoid cell line (B-LCL) established from the peripheral blood of a 68-year-old Cau...

€777.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Sipariş üzerine üretilir
1

01Genel bilgiler

Açıklama

B-LCL-HROG02, HROG biyobank serisi kapsamında yer alan, 68 yaşındaki Kafkas asıllı erkek mide kanseri hastasının periferik kanından elde edilen, insan Epstein-Barr virüsü (EBV) ile dönüştürülmüş bir B lenfoblastoid hücre hattıdır (B-LCL) olup, HROC kolorektal kanser B-LCL koleksiyonunun mide kanseri karşılığı olan HROG biyobank serisi kapsamında, 68 yaşındaki Kafkas ırkına mensup erkek bir mide kanseri hastasının periferik kanından oluşturulmuştur. Birincil periferik kan B lenfositlerinin EBV aracılı in vitro ölümsüzleştirilmesi, lenfoblast benzeri morfolojiye sahip, istikrarlı bir şekilde çoğalan bir süspansiyon hücre hattı oluşturmuştur. HROG02 hücreleri, EBV latens antijenlerini (EBNA-1, -2, -3, LMP-1, -2) ve yüksek düzeyde HLA sınıf I ve II molekülleri, ko-stimülatör moleküller CD80 ve CD86, adhezyon molekülleri CD54 ve CD58 ile B hücresi belirteçleri CD19, CD20 ve CD23'ü sürekli olarak eksprese eder.

B-LCL-HROG02, T hücresi ve NK hücresi fonksiyonel analizlerinde, HLA tiplemesinde, karışık lenfosit reaksiyonlarında, antijen sunum çalışmalarında ve CTL indüksiyon protokollerinde kullanılır. HROG hasta eşleştirilmiş biyobankası kapsamında, mide kanseri araştırmaları için tanımlanmış bir immünolojik referans sağlar ve tümörle ilişkili immün yanıtların otolog veya allojenik çalışmalarını mümkün kılar. Bu hücre hattı, mide kanserine özgü T hücresi reaktivitesi araştırmalarını ve mide tümörü immünolojisiyle ilgili hasta eşleştirilmiş immün test sistemlerini destekler.

Doku
Periferik kan
Hastalık
EBV ile transformlanmış B lenfoblastoid hücre hattı (B-LCL); mide kanseriyle ilişkili donör
Uygulamalar
İmmünoloji araştırmaları; T hücresi ve NK hücresi testleri; HLA tiplemesi; antijen sunumu çalışmaları; karışık lenfosit reaksiyonları; CTL testi hedef hücreleri; mide kanseri immünolojisi

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Askıya alma
GDO durumu
GMO-S2
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
GMO-S2: This B-LCL contains a stably maintained EBV episome encoding viral latent-phase genes (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV is classified as a risk group 2 pathogen. Handling requires BSL-2 containment. This classification applies within Germany; regulations may differ in other jurisdictions.
Biyogüvenlik seviyesi
2

03Özellikler

Morfoloji
Lenfoblast benzeri
Hücre türü
B lenfoblast
İki katına çıkma süresi
24 ila 48 saat

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
B-LCL-HROG02 (Cytion katalog numarası 302106)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606

05İfade ve duyarlılık

Virüsler
Transformant: EBV

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
RPMI 1640, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w: 2.0 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820700a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Besiyerine %15–20 oranında FBS ekleyin
Alt kültür oluşturma
Kültürü her 2–3 günde bir, önceden ısıtılmış taze tam besiyeri ile 2–5 × 10⁵ hücre/ml'ye seyreltin. Optimum yoğunluğu korumak için pasajlamadan önce canlı hücre sayısını belirleyin. Kültürlerin 2 × 10⁶ hücre/ml'yi aşmasına izin vermeyin. Gerektiğinde besiyeri değişimi için santrifüjleme (300 × g, 5 dakika) kullanılabilir. Enzimatik ayrıştırma gerekmez.
Bölünme oranı
1'den 4'e kadar
Ekim yoğunluğu
2 ila 5 × 10⁵ hücre/ml
Sıvı değişimi
Her 2 ila 3 günde bir
Çözme ve kültürleme

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı + %10 DMSO kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
68 yıl
Etnik köken
Kafkas