Ga naar de inhoud
B-LCL-HROG02
Weefsel
Perifeer bloed
Ziekte
Door EBV getransformeerde B-lymfoblastoïde cellijn (B-LCL); donor met maagkanker

Documenten

B-LCL-HROG02

Cell line · Productnummer 302106

B-LCL-HROG02 is a human Epstein-Barr virus (EBV)-transformed B lymphoblastoid cell line (B-LCL) established from the peripheral blood of a 68-year-old Cau...

€777.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op bestelling gemaakt
1

01Algemene informatie

Beschrijving

B-LCL-HROG02 is een door het humaan Epstein-Barr-virus (EBV) getransformeerde B-lymfoblastoïde cellijn (B-LCL) die is opgezet uit het perifere bloed van een 68-jarige blanke mannelijke maagkankerpatiënt binnen de HROG-biobankserie, de tegenhanger voor maagkanker van de HROC-collectie van B-LCL-cellen voor colorectale kanker. EBV-gemedieerde in-vitro-immortalisatie van primaire B-lymfocyten uit perifeer bloed leidde tot een stabiel prolifererende suspensiecellijn met een lymfoblastachtige morfologie. HROG02-cellen brengen constitutief EBV-latentie-antigenen (EBNA-1, -2, -3, LMP-1, -2) en hoge concentraties HLA-klasse I- en II-moleculen, co-stimulerende moleculen CD80 en CD86, adhesiemoleculen CD54 en CD58, en B-celmarkers CD19, CD20 en CD23.

B-LCL-HROG02 wordt toegepast in functionele testen van T-cellen en NK-cellen, HLA-typering, gemengde lymfocytreacties, onderzoeken naar antigeenpresentatie en protocollen voor de inductie van CTL’s. Binnen de HROG-biobank met patiëntgematchte monsters biedt het een gedefinieerde immunologische referentie voor onderzoek naar maagkanker, waardoor autologe of allogene studies naar tumor-geassocieerde immuunreacties mogelijk worden. De lijn ondersteunt onderzoek naar maagkankerspecifieke T-celreactiviteit en patiëntgematchte immuuntestsystemen die relevant zijn voor de immunologie van maagtumoren.

Weefsel
Perifeer bloed
Ziekte
Door EBV getransformeerde B-lymfoblastoïde cellijn (B-LCL); donor met maagkanker
Toepassingen
Immunologisch onderzoek; T-cel- en NK-celanalyses; HLA-typering; onderzoek naar antigeenpresentatie; gemengde lymfocytreacties; doelcellen voor CTL-analyses; immunologie van maagkanker

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Ophanging
GGO-status
GMO-S2
Details over de GGO-status
GMO-S2: This B-LCL contains a stably maintained EBV episome encoding viral latent-phase genes (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV is classified as a risk group 2 pathogen. Handling requires BSL-2 containment. This classification applies within Germany; regulations may differ in other jurisdictions.
Bioveiligheidsniveau
2

03Kenmerken

Morfologie
Lymfoblast-achtig
Celtype
B lymfoblast
Verdubbelingstijd
24 tot 48 uur

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
B-LCL-HROG02 (Cytion-catalogusnummer 302106)
NCBI-belastingnummer
9606

05Expressie en vatbaarheid

Virussen
Transformant: EBV

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Voeg 15–20% FBS toe aan het medium
Heruitplanten
Verdun de kweek om de 2–3 dagen tot 2–5 × 10⁵ cellen/ml met vers, voorverwarmd compleet medium. Tel de levensvatbare cellen vóór het overpotten om een optimale dichtheid te behouden. Zorg ervoor dat de celdichtheid in de kweek niet hoger wordt dan 2 × 10⁶ cellen/ml. Indien nodig kan het medium worden ververst door middel van centrifugeren (300 × g, 5 min). Enzymatische dissociatie is niet nodig.
Splitsingsverhouding
1 tot en met 4
Zaaidichtheid
2 tot 5 × 10⁵ cellen/ml
Vloeistofverversing
Om de 2 tot 3 dagen
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
68 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch