Preskoči na vsebino
B-LCL-HROG02
Tkivo
Periferna kri
Bolezen
EBV-transformirana linija B-limfoblastoidnih celic (B-LCL); darovalec z rakom želodca

Dokumenti

B-LCL-HROG02

Cell line · Številka izdelka 302106

B-LCL-HROG02 is a human Epstein-Barr virus (EBV)-transformed B lymphoblastoid cell line (B-LCL) established from the peripheral blood of a 68-year-old Cau...

€777.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Po naročilu
1

01Splošne informacije

Opis

B-LCL-HROG02 je človeška B-limfoblastoidna celična linija, transformirana z virusom Epstein-Barr (EBV) (B-LCL), vzpostavljena iz periferne krvi 68-letnega belega moškega z rakom želodca v okviru serije biobanke HROG, ki je ustreznik zbirke B-LCL za kolorektalnega raka HROC na področju raka želodca. EBV-posredovana in vitro imortalizacija primarnih B-limfocitov iz periferne krvi je ustvarila stabilno proliferirajočo suspenzijsko celično linijo z morfologijo, podobno limfoblastom. Celice HROG02 konstitutivno izražajo antigene EBV-latentnosti (EBNA-1, -2, -3, LMP-1, -2) ter visoke ravni molekul HLA razreda I in II, kostimulativnih molekul CD80 in CD86, adhezijskih molekul CD54 in CD58 ter markerjev B-celic CD19, CD20 in CD23.

B-LCL-HROG02 se uporablja v funkcionalnih testih T-celic in NK-celic, tipizaciji HLA, reakcijah mešanih limfocitov, študijah predstavitve antigenov ter protokolih indukcije CTL. V okviru biobanke HROG, ki je usklajena s pacienti, zagotavlja opredeljeno imunološko referenco za raziskave raka želodca, kar omogoča avtologne ali alogene študije imunskih odzivov, povezanih s tumorjem. Linija podpira raziskave reaktivnosti T-celic, specifičnih za raka želodca, ter imunoloških testnih sistemov, usklajenih s pacienti, ki so pomembni za imunologijo tumorjev želodca.

Tkivo
Periferna kri
Bolezen
EBV-transformirana linija B-limfoblastoidnih celic (B-LCL); darovalec z rakom želodca
Uporaba
Raziskave na področju imunologije; testi T-celic in NK-celic; tipizacija HLA; študije predstavitve antigenov; mešane limfocitne reakcije; ciljne celice za test CTL; imunologija raka želodca

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Vzmetenje
Status GSO
GMO-S2
Podrobnosti o statusu GSO
GMO-S2: This B-LCL contains a stably maintained EBV episome encoding viral latent-phase genes (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV is classified as a risk group 2 pathogen. Handling requires BSL-2 containment. This classification applies within Germany; regulations may differ in other jurisdictions.
Stopnja biološke varnosti
2

03Značilnosti

Morfologija
Limfoblastom podobni
Vrsta celice
Limfoblast B
Čas podvojitve
24 do 48 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
B-LCL-HROG02 (kataloška številka Cytion 302106)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606

05Izražanje in dovzetnost

Virusi
Transformant: EBV

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojilno gojišče dopolnite z 15–20 % FBS
Preusmeritev v drugo kulturo
Kulturo vsakih 2–3 dni razredčite na 2–5 × 10⁵ celic/ml s svežim, predhodno ogretim popolnim gojiščem. Pred prenosom v novo posodo preštejte živih celic, da ohranite optimalno gostoto. Ne dopustite, da gostota kulture preseže 2 × 10⁶ celic/ml. Po potrebi lahko za zamenjavo gojišča uporabite centrifugiranje (300 × g, 5 min). Enzimska disociacija ni potrebna.
Razmerje delitve
1 do 4
Gostota setve
2 do 5 × 10⁵ celic/ml
Obnova tekočine
Vsakih 2 do 3 dni
Odtaljevanje in gojenje

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za krioprezervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
68 let
Etnična pripadnost
Kavkaški