Tartalomra ugrás
B-LCL-HROG02
Szövet
Perifériás vér
Betegség
EBV-vel transzformált B-limfoblasztos sejtvonal (B-LCL); gyomorrákkal összefüggő donor

Dokumentumok

B-LCL-HROG02

Cell line · Termékszám 302106

B-LCL-HROG02 is a human Epstein-Barr virus (EBV)-transformed B lymphoblastoid cell line (B-LCL) established from the peripheral blood of a 68-year-old Cau...

€777.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Rendelésre készül
1

01Általános információk

Leírás

A B-LCL-HROG02 egy humán Epstein-Barr-vírus (EBV) által transzformált B-limfoblasztos sejtvonal (B-LCL), amelyet a HROG biobank-sorozat keretében egy 68 éves kaukázusi férfi gyomorrákos beteg perifériás véréből állítottak elő; ez a sorozat a HROC vastagbélrákos B-LCL-gyűjtemény gyomorrákos megfelelője. Az elsődleges perifériás vérből származó B-limfociták EBV-közvetített in vitro immortilizálása révén egy stabilan proliferáló, limfoblaszt-szerű morfológiájú szuszpenziós sejtvonal jött létre. A HROG02 sejtek konstitutív módon expresszálják az EBV-latencia-antigéneket (EBNA-1, -2, -3, LMP-1, -2) és magas szintű HLA I. és II. osztályú molekulákat, a CD80 és CD86 ko-stimuláló molekulákat, a CD54 és CD58 adhéziós molekulákat, valamint a CD19, CD20 és CD23 B-sejt markereket fejezik ki.

A B-LCL-HROG02-t T-sejt- és NK-sejt-funkcionális vizsgálatokban, HLA-tipizálásban, vegyes limfocita-reakciókban, antigénprezentációs vizsgálatokban, valamint CTL-indukciós protokollokban alkalmazzák. A HROG beteg-párosított biobankon belül meghatározott immunológiai referenciát nyújt a gyomorrák-kutatás számára, lehetővé téve a tumorral összefüggő immunválaszok autológ vagy allogén vizsgálatát. A vonal támogatja a gyomorrák-specifikus T-sejt-reaktivitás vizsgálatát, valamint a gyomordaganat-immunológiához kapcsolódó, beteg-párosított immunvizsgálati rendszerek kutatását.

Szövet
Perifériás vér
Betegség
EBV-vel transzformált B-limfoblasztos sejtvonal (B-LCL); gyomorrákkal összefüggő donor
Alkalmazások
Immunológiai kutatás; T-sejt- és NK-sejt-vizsgálatok; HLA-tipizálás; antigénprezentációs vizsgálatok; vegyes limfocita-reakciók; CTL-vizsgálat célsejtjei; gyomorrák immunológiája

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Felfüggesztés
GMO-státusz
GMO-S2
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
GMO-S2: This B-LCL contains a stably maintained EBV episome encoding viral latent-phase genes (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV is classified as a risk group 2 pathogen. Handling requires BSL-2 containment. This classification applies within Germany; regulations may differ in other jurisdictions.
Biológiai biztonsági szint
2

03Jellemzők

Morfológia
Limfoblaszt-szerű
Sejttípus
B lymphoblast
Kettőzési idő
24-48 óra

04Azonosítók

Hivatkozás
B-LCL-HROG02 (Cytion katalógusszám: 302106)
NCBI adóazonosító szám
9606

05Kifejeződés és fogékonyság

Vírusok
Transzformáns: EBV

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabil glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion 820700a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt 15–20% FBS-szel egészítsük ki
Átültetés
2–3 naponta hígítsuk a tenyészetet friss, előmelegített teljes táptalajjal 2–5 × 10⁵ sejt/ml sűrűségre. Az optimális sűrűség fenntartása érdekében az átültetés előtt számoljuk meg az életképes sejteket. Ne hagyja, hogy a tenyészetek sűrűsége meghaladja a 2 × 10⁶ sejt/ml értéket. Szükség esetén centrifugálással (300 × g, 5 perc) cserélheti ki a táptalajt. Enzimális disszociációra nincs szükség.
Osztási arány
1–4
Ültetési sűrűség
2–5 × 10⁵ sejt/ml
Folyadékcsere
2-3 naponta
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
68 év
Etnikai hovatartozás
Kaukázusi