Przejdź do treści
B-LCL-HROG02
Chusteczka
Krew obwodowa
Choroba
Linia komórek limfoblastoidalnych typu B poddanych transformacji wirusem EBV (B-LCL); dawca z rakiem żołądka

Dokumenty

B-LCL-HROG02

Cell line · Numer produktu 302106

B-LCL-HROG02 is a human Epstein-Barr virus (EBV)-transformed B lymphoblastoid cell line (B-LCL) established from the peripheral blood of a 68-year-old Cau...

€777.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

Wykonane na zamówienie
1

01Informacje ogólne

Opis

B-LCL-HROG02 to ludzka linia komórek limfoblastoidalnych typu B, transformowana wirusem Epsteina-Barra (EBV) (B-LCL), wyhodowana z krwi obwodowej 68-letniego mężczyzny rasy kaukaskiej cierpiącego na raka żołądka, pochodząca z serii biobanku HROG, stanowiącej odpowiednik kolekcji B-LCL raka jelita grubego HROC w zakresie raka żołądka. Immortalizacja pierwotnych limfocytów B krwi obwodowej in vitro za pośrednictwem wirusa EBV doprowadziła do powstania stabilnie proliferującej linii komórek zawiesinowych o morfologii przypominającej limfoblasty. Komórki HROG02 konstytutywnie wyrażają antygeny latencji wirusa EBV (EBNA-1, -2, -3, LMP-1, -2) oraz wysokie poziomy cząsteczek HLA klasy I i II, cząsteczek kostymulujących CD80 i CD86, cząsteczek adhezyjnych CD54 i CD58, a także markerów komórek B: CD19, CD20 i CD23.

Linia B-LCL-HROG02 znajduje zastosowanie w testach funkcjonalnych komórek T i komórek NK, typowaniu HLA, reakcjach mieszanych limfocytów, badaniach prezentacji antygenów oraz protokołach indukcji komórek CTL. W ramach biobanku HROG, dopasowanego do pacjentów, stanowi ona zdefiniowany punkt odniesienia immunologicznego dla badań nad rakiem żołądka, umożliwiając badania autologiczne lub allogeniczne nad odpowiedziami immunologicznymi związanymi z nowotworem. Linia ta wspiera badania reaktywności komórek T specyficznych dla raka żołądka oraz systemów testów immunologicznych dopasowanych do pacjentów, istotnych dla immunologii nowotworów żołądka.

Chusteczka
Krew obwodowa
Choroba
Linia komórek limfoblastoidalnych typu B poddanych transformacji wirusem EBV (B-LCL); dawca z rakiem żołądka
Zastosowania
Badania z zakresu immunologii; testy komórek T i komórek NK; typowanie HLA; badania nad prezentacją antygenów; reakcje mieszanych limfocytów; komórki docelowe w testach CTL; immunologia raka żołądka

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zawieszenie
Status GMO
GMO-S2
Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
GMO-S2: This B-LCL contains a stably maintained EBV episome encoding viral latent-phase genes (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV is classified as a risk group 2 pathogen. Handling requires BSL-2 containment. This classification applies within Germany; regulations may differ in other jurisdictions.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
2

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobne do limfoblastów
Typ komórki
Limfoblast B
Czas podwojenia
24 do 48 godzin

04Identyfikatory

Źródło
B-LCL-HROG02 (numer katalogowy Cytion 302106)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606

05Ekspresja i podatność

Wirusy
Transformant: EBV

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Do pożywki należy dodać 15–20% FBS
Hodowla komórek w subkulturze
Co 2–3 dni rozcieńczać hodowlę do stężenia 2–5 × 10⁵ komórek/ml świeżą, wstępnie podgrzaną pożywką kompletną. Przed przesadzeniem należy policzyć żywe komórki, aby utrzymać optymalne zagęszczenie. Nie należy dopuścić do przekroczenia gęstości hodowli wynoszącej 2 × 10⁶ komórek/ml. W razie potrzeby do wymiany pożywki można zastosować wirowanie (300 × g, 5 min). Nie jest wymagana dysocjacja enzymatyczna.
Współczynnik podziału
od 1 do 4
Gęstość wysiewu
od 2 do 5 × 10⁵ komórek/ml
Odnawianie płynów
Co 2 do 3 dni
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
68 lat
Pochodzenie etniczne
Kaukaski