Mine otse sisu juurde
B-LCL-HROG02
Kude
Perifeerne veri
Haigus
EBV-ga transformeeritud B-lümfoblastoidne rakuliin (B-LCL); maovähiga seotud doonor

Dokumendid

B-LCL-HROG02

Cell line · Toote number 302106

B-LCL-HROG02 is a human Epstein-Barr virus (EBV)-transformed B lymphoblastoid cell line (B-LCL) established from the peripheral blood of a 68-year-old Cau...

€777.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Tellimusel valmistatud
1

01Üldine teave

Kirjeldus

B-LCL-HROG02 on inimese Epstein-Barr-viiruse (EBV) poolt transformeeritud B-lümfoblastoidne rakuliin (B-LCL), mis on loodud HROG-biopanga seeria raames 68-aastase kaukaasia päritolu meessoost maovähi patsiendi perifeersest verest; see on HROC-i kolorektaalvähi B-LCL-kogumiku maovähi vastand. EBV-vahendatud primaarsete perifeerse vere B-lümfotsüütide in vitro immortaliseerimine andis tulemuseks stabiilselt paljuneva suspensioonrakkude liini, millel on lümfoblastilaadne morfoloogia. HROG02 rakud ekspresseerivad konstitutiivselt EBV latentsusantigeene (EBNA-1, -2, -3, LMP-1, -2) ning kõrgetes kontsentratsioonides HLA I- ja II-klassi molekule, kostimuleerivaid molekule CD80 ja CD86, adhesiivmolekule CD54 ja CD58 ning B-rakkude markereid CD19, CD20 ja CD23.

B-LCL-HROG02-d kasutatakse T-rakkude ja NK-rakkude funktsionaalsetes analüüsides, HLA-tüüpimisel, segatud lümfotsüütide reaktsioonides, antigeeni esitamise uuringutes ja CTL-i indutseerimise protokollides. HROG-i patsiendiga sobitatud biopangas pakub see määratletud immunoloogilist võrdlusmaterjali maovähi uurimiseks, võimaldades läbi viia autoloogseid või allogeenseid uuringuid kasvajaga seotud immuunvastuste kohta. See liin toetab maovähile spetsiifilise T-rakkude reaktiivsuse uurimist ning patsiendiga sobitatud immuunanalüüsisüsteeme, mis on seotud maovähi immunoloogiaga.

Kude
Perifeerne veri
Haigus
EBV-ga transformeeritud B-lümfoblastoidne rakuliin (B-LCL); maovähiga seotud doonor
Rakendused
Immunoloogilised uuringud; T-rakkude ja NK-rakkude analüüsid; HLA-tüüpimine; antigeeni esitamise uuringud; segatud lümfotsüütide reaktsioonid; CTL-analüüsi sihrakud; maovähi immunoloogia

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Vedrustus
GMO-staatus
GMO-S2
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S2: This B-LCL contains a stably maintained EBV episome encoding viral latent-phase genes (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV is classified as a risk group 2 pathogen. Handling requires BSL-2 containment. This classification applies within Germany; regulations may differ in other jurisdictions.
Bioloogilise ohutuse tase
2

03Omadused

Morfoloogia
Lümfoblastilaadsed
Rakutüüp
B lümfoblast
Kahekordistumisaeg
24 kuni 48 tundi

04Tunnused

Viide
B-LCL-HROG02 (Cytioni katalooginumber 302106)
NCBI maksukood
9606

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Viirused
Transformant: EBV

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Lisage kasvukeskkonnale 15–20% FBS-i
Kultuuri edasikasvatamine
Lahjendage kultuuri iga 2–3 päeva tagant värske, eelsoojendatud täisväärtusliku kasvukeskkonnaga kontsentratsioonini 2–5 × 10⁵ rakku/ml. Loendage eluvõimelisi rakke enne ülekandmist, et säilitada optimaalne tihedus. Ärge laske kultuuride tihedusel ületada 2 × 10⁶ rakku/ml. Vajaduse korral võib keskkonna vahetamiseks kasutada tsentrifuugimist (300 × g, 5 min). Ensümaatilist dissotsiatsiooni ei ole vaja.
Jagamissuhe
1–4
Külvitihedus
2–5 × 10⁵ rakku/ml
Vedeliku vahetus
Iga 2 kuni 3 päeva tagant
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikuna kasutame täielikku kasvukeskkonda + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
68 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia