Prejsť na obsah
B-LCL-HROG02
Tkanivo
Periférna krv
Choroba
B-lymfoblastoidná bunková línia transformovaná vírusom EBV (B-LCL); darca s rakovinou žalúdka

Dokumenty

B-LCL-HROG02

Cell line · Číslo výrobku 302106

B-LCL-HROG02 is a human Epstein-Barr virus (EBV)-transformed B lymphoblastoid cell line (B-LCL) established from the peripheral blood of a 68-year-old Cau...

€777.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na objednávku
1

01Všeobecné informácie

Popis

B-LCL-HROG02 je ľudská B-lymfoblastoidná bunková línia transformovaná vírusom Epstein-Barrového (EBV) (B-LCL), ktorá bola získaná z periférnej krvi 68-ročného kaukazského muža s rakovinou žalúdka v rámci série biobanky HROG, ktorá je ekvivalentom kolekcie B-LCL pre kolorektálny karcinóm HROC v prípade rakoviny žalúdka. Imortalizácia primárnych B-lymfocytov z periférnej krvi sprostredkovaná vírusom EBV in vitro viedla k vytvoreniu stabilne proliferujúcej suspenznej buneckej línie s morfológiou podobnou lymfoblastom. Bunky HROG02 konštitutívne exprimujú antigény latencie EBV (EBNA-1, -2, -3, LMP-1, -2) a vysoké hladiny molekúl HLA triedy I a II, kostimulačných molekúl CD80 a CD86, adhéznych molekúl CD54 a CD58, ako aj markerov B-buniek CD19, CD20 a CD23.

B-LCL-HROG02 sa používa vo funkčných testoch T-buniek a NK-buniek, pri typizácii HLA, v reakciách zmiešaných lymfocytov, pri štúdiách prezentácie antigénov a v protokoloch indukcie CTL. V rámci biobanky HROG, ktorá je zosúladená s pacientmi, poskytuje definovanú imunologickú referenciu pre výskum rakoviny žalúdka, čím umožňuje autológne alebo alogénne štúdie imunitných reakcií spojených s nádorom. Táto línia podporuje výskum reaktivity T-buniek špecifických pre rakovinu žalúdka a imunitných testovacích systémov zosúladených s pacientmi, ktoré sú relevantné pre imunológiu nádorov žalúdka.

Tkanivo
Periférna krv
Choroba
B-lymfoblastoidná bunková línia transformovaná vírusom EBV (B-LCL); darca s rakovinou žalúdka
Aplikácie
Imunologický výskum; testy T-buniek a NK-buniek; typizácia HLA; štúdie prezentácie antigénov; reakcie zmiešaných lymfocytov; cieľové bunky pre testy CTL; imunológia rakoviny žalúdka

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Zavesenie
Stav GMO
GMO-S2
Podrobnosti o štatúte GMO
GMO-S2: This B-LCL contains a stably maintained EBV episome encoding viral latent-phase genes (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV is classified as a risk group 2 pathogen. Handling requires BSL-2 containment. This classification applies within Germany; regulations may differ in other jurisdictions.
Úroveň biologickej bezpečnosti
2

03Charakteristiky

Morfológia
Lymfoblastom podobné
Typ bunky
B lymfoblast
Doba zdvojnásobenia
24 až 48 hodín

04Identifikátory

Citácia
B-LCL-HROG02 (katalógové číslo Cytion 302106)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606

05Prejav a náchylnosť

Vírusy
Transformant: EBV

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Do živného média pridajte 15–20 % FBS
Rozmnožovanie kultúr
Každé 2–3 dni zrieďte kultúru na koncentráciu 2–5 × 10⁵ buniek/ml čerstvým, vopred zahriatym kompletným médiom. Pred pasážovaním spočítajte životaschopné bunky, aby ste zachovali optimálnu hustotu. Nedovoľte, aby hustota kultúr presiahla 2 × 10⁶ buniek/ml. V prípade potreby je možné na výmenu média použiť centrifugáciu (300 × g, 5 min). Enzymatická disociácia nie je potrebná.
Pomer rozdelenia
1 až 4
Hustota výsevu
2 až 5 × 10⁵ buniek/ml
Obnova kvapaliny
Každé 2 až 3 dni
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Mrazové médium
Ako médium na kryokonzerváciu používame kompletné rastové médium + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
68 rokov
Etnická príslušnosť
Kaukazský