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B-LCL-HROG02
Tessuto
Sangue periferico
Malattia
Linea cellulare linfoblastoide B trasformata dall’EBV (B-LCL); donatore affetto da carcinoma gastrico

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B-LCL-HROG02

Cell line · Codice prodotto 302106

B-LCL-HROG02 is a human Epstein-Barr virus (EBV)-transformed B lymphoblastoid cell line (B-LCL) established from the peripheral blood of a 68-year-old Cau...

€777.00IVA e spese di spedizione escluse

Personalizzazione / Suggerimenti

Su ordinazione
1

01Informazioni generali

Descrizione

B-LCL-HROG02 è una linea cellulare linfoblastoide B trasformata dal virus di Epstein-Barr (EBV) umano (B-LCL) ottenuta dal sangue periferico di un paziente maschio caucasico di 68 anni affetto da cancro gastrico, nell’ambito della serie della biobanca HROG, la controparte per il cancro gastrico della collezione HROC di B-LCL per il cancro colorettale. L’immortalizzazione in vitro mediata dall’EBV dei linfociti B primari del sangue periferico ha generato una linea cellulare in sospensione a proliferazione stabile con morfologia simile a quella dei linfoblasti. Le cellule HROG02 esprimono in modo costitutivo gli antigeni di latenza dell’EBV (EBNA-1, -2, -3, LMP-1, -2) e livelli elevati di molecole HLA di classe I e II, molecole co-stimolatorie CD80 e CD86, molecole di adesione CD54 e CD58, nonché marcatori delle cellule B CD19, CD20 e CD23.

La linea B-LCL-HROG02 viene utilizzata in saggi funzionali su cellule T e cellule NK, tipizzazione HLA, reazioni linfocitarie miste, studi sulla presentazione dell’antigene e protocolli di induzione dei CTL. All’interno della biobanca HROG abbinata ai pazienti, fornisce un riferimento immunologico definito per la ricerca sul cancro gastrico, consentendo studi autologhi o allogenici sulle risposte immunitarie associate al tumore. La linea supporta le indagini sulla reattività dei linfociti T specifiche per il cancro gastrico e i sistemi di analisi immunologica abbinati ai pazienti, rilevanti per l’immunologia dei tumori gastrici.

Tessuto
Sangue periferico
Malattia
Linea cellulare linfoblastoide B trasformata dall’EBV (B-LCL); donatore affetto da carcinoma gastrico
Applicazioni
Ricerca in immunologia; analisi delle cellule T e delle cellule NK; tipizzazione HLA; studi sulla presentazione dell'antigene; reazioni linfocitarie miste; cellule bersaglio per l'analisi dei linfociti citotossici (CTL); immunologia del cancro gastrico

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Sospensione
Presenza di OGM
GMO-S2
Dettagli sullo stato degli OGM
GMO-S2: This B-LCL contains a stably maintained EBV episome encoding viral latent-phase genes (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV is classified as a risk group 2 pathogen. Handling requires BSL-2 containment. This classification applies within Germany; regulations may differ in other jurisdictions.
Livello di biosicurezza
2

03Caratteristiche

Morfologia
Linfoblasto-simile
Tipo di cellula
Linfoblasto B
Tempo di raddoppio
da 24 a 48 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
B-LCL-HROG02 (codice catalogo Cytion 302106)
Codice fiscale NCBI
9606

05Espressione e suscettibilità

Virus
Trasformante: EBV

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Aggiungere al terreno di coltura il 15–20% di FBS
Subcoltura
Diluire la coltura a 2–5 × 10⁵ cellule/ml con terreno completo fresco e preriscaldato ogni 2–3 giorni. Contare le cellule vitali prima del ripasso per mantenere una densità ottimale. Non lasciare che le colture superino i 2 × 10⁶ cellule/ml. Se necessario, è possibile ricorrere alla centrifugazione (300 × g, 5 min) per sostituire il terreno di coltura. Non è richiesta alcuna dissociazione enzimatica.
Rapporto di frazionamento
Da 1 a 4
Densità di semina
da 2 a 5 × 10⁵ cellule/ml
Rinnovo dei fluidi
Ogni 2 o 3 giorni
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Controllo di qualità e crioconservazione

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo + 10% DMSO per ottenere un'adeguata vitalità post-scongelamento.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
68 anni
Etnia
Caucasico