
- Vävnad
- Perifert blod
- Sjukdom
- EBV-transformerad B-lymfoblastoidcellinje (B-LCL); donator med magcancer
Dokument
B-LCL-HROG02
Cell line · Produktnummer 302106
B-LCL-HROG02 is a human Epstein-Barr virus (EBV)-transformed B lymphoblastoid cell line (B-LCL) established from the peripheral blood of a 68-year-old Cau...
Anpassning / Rekommendationer
- B-LCL-HROG02Cell line€777.00
01Allmän information
- Beskrivning
B-LCL-HROG02 är en mänsklig B-lymfoblastoidcellinje som transformerats av Epstein-Barr-viruset (EBV) (B-LCL) som etablerats från perifert blod från en 68-årig kaukasisk manlig magcancerpatient inom HROG-biobankserien, motsvarigheten för magcancer till HROC-samlingen av B-LCL från kolorektalcancer. EBV-medierad in vitro-immortalisering av primära B-lymfocyter från perifert blod genererade en stabilt prolifererande suspensionscellinje med lymfoblastliknande morfologi. HROG02-celler uttrycker konstant EBV-latensantigener (EBNA-1, -2, -3, LMP-1, -2) samt höga nivåer av HLA-molekyler av klass I och II, kostimulerande molekyler CD80 och CD86, adhesionsmolekyler CD54 och CD58 samt B-cellsmarkörer CD19, CD20 och CD23.
B-LCL-HROG02 används i funktionella analyser av T-celler och NK-celler, HLA-typning, blandade lymfocytreaktioner, studier av antigenpresentation samt protokoll för induktion av cytotoxiska T-celler (CTL). Inom den patientanpassade HROG-biobanken utgör den en definierad immunologisk referens för forskning om magcancer, vilket möjliggör autologa eller allogena studier av tumörassocierade immunreaktioner. Linjen stödjer undersökningar av magcancerspecifik T-cellsreaktivitet och patientanpassade immunanalyssystem som är relevanta för magtumörimmunologi.
- Vävnad
- Perifert blod
- Sjukdom
- EBV-transformerad B-lymfoblastoidcellinje (B-LCL); donator med magcancer
- Ansökningar
- Immunologisk forskning; T-cells- och NK-cellsanalyser; HLA-typning; studier av antigenpresentation; blandade lymfocytreaktioner; målceller för CTL-analys; immunologi vid magcancer
02Klassificering
- Organism
- Människa
- Kön
- Man
- Tillväxtegenskaper
- Upphängning
- GMO-status
- GMO-S2
- Detaljer om GMO-status
- GMO-S2: This B-LCL contains a stably maintained EBV episome encoding viral latent-phase genes (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV is classified as a risk group 2 pathogen. Handling requires BSL-2 containment. This classification applies within Germany; regulations may differ in other jurisdictions.
- Biosäkerhetsnivå
- 2
03Egenskaper
- Morfologi
- Lymfoblastliknande
- Celltyp
- B lymfoblast
- Fördubblingstid
- 24 till 48 timmar
04Identifierare
- Källa
- B-LCL-HROG02 (Cytion-katalognummer 302106)
- NCBI-skattenummer
- 9606
05Uttryck och mottaglighet
- Virus
- Transformant: EBV
06Hantering och odling
- Odlingsmedium
- RPMI 1640, med: 2,0 mM stabilt glutamin, med: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
- Inkubationsatmosfär
37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.
- Kosttillskott
- Tillsätt 15–20 % FBS till odlingsmediet
- Vidareodling
- Späd odlingen till 2–5 × 10⁵ celler/ml med färskt, förvärmt komplett odlingsmedium var 2–3:e dag. Räkna antalet livsdugliga celler före passering för att upprätthålla optimal celltäthet. Låt inte odlingarna överstiga 2 × 10⁶ celler/ml. Centrifugering (300 × g, 5 min) kan användas för att byta medium vid behov. Ingen enzymatisk dissociation krävs.
- Uppdelningsförhållande
- 1 till 4
- Såtäthet
- 2 till 5 × 10⁵ celler/ml
- Vätskeförnyelse
- Var 2:a till 3:e dag
- Upptining och odling
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Kvalitetskontroll och kryokonservering
- Frysmedel
- Som kryopreserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining.
- Förvaringsförhållanden
För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.
- Leveransvillkor
Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.
08Donator
- Donatorns ålder
- 68 år
- Etnicitet
- Kaukasisk
09Juridiska frågor och säkerhet
- Säkerhetsföreskrifter
- När man planerar att förvara en kryovial i flytande kväve för framtida upptining är det obligatoriskt att följa strikta säkerhetsåtgärder. Lämpliga skyddshandskar och skyddskläder är nödvändiga, och ansiktsmask eller skyddsglasögon måste användas vid överföring av frysta prover till eller från tanken med flytande kväve. Detta för att minska risken för skador på grund av eventuella explosioner i frysbehållaren vid borttagning, vilket kan leda till att vassa fragment projiceras.
- Garanti
På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet
För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring
- Avtal med tredje part gäller
- Ja